经角膜电刺激对大鼠视神经损伤后视网膜小胶质细胞活性影响的研究

发布时间：2017-09-18 07:33

  本文关键词：经角膜电刺激对大鼠视神经损伤后视网膜小胶质细胞活性影响的研究

  更多相关文章： 视神经损伤 经角膜电刺激 视网膜神经节细胞 小胶质细胞 肿瘤坏死因子-α

【摘要】：目的 探讨经角膜电刺激(transcorneal electrical stimulation, TES)对视神经损伤后视网膜小胶质细胞(1etinal microglia cells, RMGs)活性及肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)表达的影响。 方法 研究TES对视神经横断伤(optic nerve transection, ONT)后视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells, RGCs)存活及RMGs活化的影响。以成年雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠为研究对象,将90只成年雄性SD大鼠随机分成以下3组：对照组(Control组)；ONT+假刺激组(ONT+Sham组):ONT+TES组(()NT+TES组)。荧光金(fluorogold, FG)经双侧上丘逆行标记视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs),7d后制作ONT模型。Control组只暴露视神经但不切断视神经；ONT+Sham组在术后Od、4d及0d、4d、7d、10d给予假性TES; ONT+TES组在术后0d、4d及0d、4d、7d、10d给予TES。上述各组在术后7d及14d运用视网膜铺片及免疫荧光技术行RGCs及RMGs计数；应用荧光双标染色法检测TNF-α与RMGs是否共同表达；同时对术后7d及14d各组大鼠视网膜TNF-α的表达水平进行检测。 结果 与Control组比较,ONT后7d及14d视网膜的RGCs数量显著减少,RMGs数量显著增多,且RMGs由静止状态转变为活化状态。ONT后7d及14d, ONT+TES组存活的RGCs数显著高于ONT+Sham组；ONT后7d,ONT+TES组活化的RMGs数及阿米巴样的RMGs数显著低于ONT+Sham组：ONT后14d,ONT+TES组活化的RMGs数与ONT+Sham组相比无明显差异,但是其阿米巴样的RMGs数显著低于ONT+Sham组。免疫荧光双标染色显示ONT后7d,TNF-α表达于阿米巴样的IMGs中；ONT后14d,TNF-α表达于所有类型的RMGs中。与Control组比较,ONT后7d及14d视网膜的TNF-α的表达显著增加,而()NT+TES组TNF-α的表达明显低于ONT+Sham组。 结论 我们的研究发现视神经损伤会激活RMGs,增加促炎因子TNF-α的表达。TES可能通过抑制神经损伤后RMGs的增殖活化,降低TNF-α的表达,进而减轻RGCs的凋亡,发挥神经保护作用。
【关键词】：视神经损伤 经角膜电刺激 视网膜神经节细胞 小胶质细胞 肿瘤坏死因子-α
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R774.1
【目录】：

• 致谢4-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 缩略词表（abbreviaet)11-12
• 目录12-14
• 1 前言14-16
• 2 材料和方法16-22
• 2.1 材料和主要设备16-17
• 2.2 动物分组17
• 2.3 荧光金(FG)逆行示踪标记RGCs17
• 2.4 视神经横断伤(OPTIC NERVE TRANSECTION,ONT)模型的建立17-18
• 2.5 经角膜电刺激(TES)的实施18
• 2.6 标本的处理18-19
• 2.7 免疫荧光染色和视网膜铺片19
• 2.8 激光共聚焦显微镜拍照及RGCs和RMGs计数19-20
• 2.9 WESTERN BLOT免疫印迹分析20-21
• 2.10 统计学分析21-22
• 3 结果22-31
• 3.1 TES提高ONT后RGCs的存活率22-25
• 3.2 TES减少ONT后视网膜神经节细胞层(GANGLION CELLLAYER,GCL)RMGs的活化25-27
• 3.3 ONT后TNF-A在视网膜GCL层中主要定位于RMGs且表达增加,TES能够抑制ONT后TNF-A的表达27-31
• 4 讨论31-36
• 参考文献36-41
• 综述41-53
• 参考文献47-53
• 作者简历及在读期间所取得的科研成果53

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李校坤,胡爱莲,许华,郑远远,姚成灿,洪岸;重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗视神经损伤的药理学研究[J];华西药学杂志;2001年06期

2 ;我国视神经微血管重建成功[J];山东中医药大学学报;2001年02期

3 孙瑞霞;视神经损伤与再生[J];广东医学;2002年11期

4 林慧;视神经损伤60例分析[J];河南实用神经疾病杂志;2002年04期

5 裘义松;视神经损伤临床治疗观察[J];浙江临床医学;2002年09期

6 牛俊波;中西医结合治疗外伤性视神经损伤33例[J];实用中医药杂志;2002年08期

7 袁邦清;谭新民;王守森;王如密;;翼点入路开颅视神经管减压开放术治疗视神经损伤——附16例报告[J];临床急诊杂志;2002年05期

8 李凌;外伤性视神经损伤药物治疗临床分析[J];眼外伤职业眼病杂志.附眼科手术;2003年10期

9 杨延芳;中西医结合治疗间接视神经损伤27例[J];中国临床康复;2003年07期

10 黄厚斌,张卯年,马志中;视神经损伤反向夹持镊的力学性质分析及测量[J];眼科新进展;2004年02期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 邱怀雨;魏世辉;;轻型间接视神经损伤的临床特点分析[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年

2 王志军;;病案9 间接性视神经损伤[A];第十次全省中、西医眼科学术交流会（暨吉安地区眼科专委会成立会议）学术论文集[C];2010年

3 马东;王勇;马喜;刘培英;白永文;黄建军;;视神经损伤的显微手术治疗[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年

4 白永文;黄建军;;视神经损伤的手术治疗[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年

5 王文军;闫元奎;唐罗生;;大鼠视神经损伤视网膜内p38丝裂原活化蛋白激酶活性的表达[A];中国眼底病论坛·全国眼底病专题学术研讨会论文汇编[C];2008年

6 施天严;俞颂平;朱艳霞;李霞;;轻型间接视神经损伤的临床特点分析[A];2011年浙江省眼科学术会议论文集[C];2011年

7 傅继弟;;颅脑外伤合并视神经损伤685例的临床观察[A];中国中西医结合学会神经外科专业委员会第一届学术大会暨神经外科专业委员会成立大会论文汇编[C];2014年

8 薛飞;曹云莉;李泽卿;王秋萍;吴昆e，

本文编号：874224