Notch信号通路在人角膜内皮细胞的表达及参与调控EnMT的初步研究

发布时间：2017-09-26 12:28

  本文关键词：Notch信号通路在人角膜内皮细胞的表达及参与调控EnMT的初步研究

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【摘要】：目的：检测Notch信号通路受/配体、下游靶基因Hes1在正常人角膜内皮细胞（hCECs）的表达情况，并初步探索其参与调控角膜内皮细胞间质化（EnMT）的可能性，寻找调控角膜内皮细胞分化的新途径。 方法：取正常人角膜供体材料，分离角膜后弹力层及内皮细胞层，予以4％多聚甲醛固定，通过wholemount免疫荧光染色检测Notch信号通路受/配体、下游靶基因Hes1在正常人角膜内皮细胞的表达情况；分组培养人角膜内皮细胞，设置实验组（加入DAPT10uM）以及空白对照组（不加入DAPT），通过免疫荧光法及RT-PCR检测Notch下游靶基因Hes1与α-SMA在体外培养细胞中的表达情况，探索其表达及通路激活过程与角膜内皮细胞分化之间的关系。 结果： （1）免疫荧光染色证实除Jagged1外，Notch信号通路受/配体在正常人角膜内皮层表达均呈阳性，但分布的情况不一；Notch信号靶基因Hes1在细胞胞浆表达。 （2）体外培养人角膜内皮细胞中，DAPT（+）组细胞形态趋于六边形，免疫荧光染色检测α-SMA（-）；DAPT（-）组细胞呈成纤维细胞样外观，，免疫荧光染色检测α-SMA（+）。 （3）免疫荧光染色检测到DAPT（+）组细胞中Hes1主要在细胞胞浆表达，DAPT（-）组细胞中Hes1在细胞胞浆及胞核表达；RT-PCR检测Hes1扩增条带，DAPT（+）组Hes1条带较DAPT（-）组弱。 结论: （1）Notch信号通路存在于正常人角膜内皮细胞层中，且处于未激活状态； （2）体外培养人角膜内皮细胞时，Notch信号通路被激活； （3）Notch信号通路激活可能参与促进人角膜内皮细胞EnMT过程。
【关键词】：Notch信号通路 角膜内皮细胞 分化
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R772.2
【目录】：

• 主要缩略语英汉对照表4-5
• 中文摘要5-6
• Abstract6-8
• 前言8-10
• 材料仪器10-12
• 实验方法12-17
• 实验结果17-21
• 讨论21-23
• 结论23-24
• 参考文献24-28
• 综述28-37
• 参考文献34-37
• 致谢37

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本文编号：923522