WERI-Rb1肿瘤干细胞的分离扩增及鉴定

发布时间：2017-10-08 19:38

  本文关键词：WERI-Rb1肿瘤干细胞的分离扩增及鉴定

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【摘要】：目的分离培养人视网膜母细胞瘤细胞系WERI-Rb1中的肿瘤干细胞,建立肿瘤干细胞的鉴定方法。方法将WERI-Rb1细胞系接种至无血清培养基,对其中的肿瘤干细胞行分离、培养扩增及传代,观察细胞形态,采用旁群细胞检测、克隆形成实验、CD133流式细胞仪检测、荧光定量PCR等方法对肿瘤干细胞特性进行鉴定。结果体外扩增培养的WERI-Rb1细胞系呈疏松葡萄状团块,WERI-Rb1细胞系中存在比例稳定的旁群细胞(0.075±0.017)%,无血清培养基可分离扩增培养出WERI-Rb1中的肿瘤干细胞,形成类l 似胚胎干细胞的克隆团块,后者具备较高的克隆形成能力,克隆形成率为(31.70±1.89)%,且干细胞标记物CD133的基因及蛋白均高表达,CD133基因表达量为WERI-Rb1的(2.25±0.19)倍。结论本研究阐明了视网膜母细胞瘤细胞系WERI-Rb1肿瘤干细胞的分离、培养、扩增及鉴定方法,证明了WERI-Rb1中肿瘤干细胞的存在,为后续对视网膜母细胞瘤的治疗提供线索,为进一步研究视网膜母细胞瘤肿瘤干细胞及胚胎干细胞等的特性对比提供细胞来源。
【作者单位】： 暨南大学附属深圳眼科医院;深圳市眼科医院 深圳眼科学重点实验室;
【关键词】： 视网膜母细胞瘤 肿瘤干细胞 细胞培养
【分类号】：R739.7
【正文快照】： 肿瘤干细胞是肿瘤中具有干细胞特性的一类细胞,既具备高度增殖能力与自我更新能力,也具备多向分化潜能。随着第1个肿瘤干细胞——白血病干细胞的成功分离鉴定[1],许多实验室已从多种肿瘤组织中分离出了肿瘤干细胞。目前已有前期研究从人视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)组织

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