aFGF通过MAPK通路对抗庆大霉素诱导星形胶质细胞损伤的机制

发布时间：2017-10-13 06:20

  本文关键词：aFGF通过MAPK通路对抗庆大霉素诱导星形胶质细胞损伤的机制

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【摘要】：目的：体外培养星形胶质细胞,使用药物进行干预,观察酸性成纤维细胞生长因子(acidicfibroblastgrowthfactor,aFGF)对抗庆大霉素对海马星形胶质细胞毒性作用的MAPK (mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号通路中的P38、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)1、ERK2、c-Jun氨基末端激酶(JNK)1、JNK2的表达情况,探讨aFGF保护受损的海马星形胶质细胞可能的机制。方法：选取出生24h内的SD乳鼠用机械分离法完整的取出海马组织,经剪碎、消化、离心处理后得到星形胶质细胞置于恒温培养箱内孵育,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色方法对传至第三代的细胞进行鉴定,纯度95%可用于实验研究。在96孔培养板上接种细胞,置孵箱内培育3天后进行实验操作。实验分为3组：a.对照组：正常培养；b.损伤组(GM组)：2.Og/LGM培养24h;c.细胞生长因子保护组(aFGF+GM):加入4.25ug/L的aFGF作用24h后再加入2.0g/LGM培养24h。Western Blot检测MAPK信号通路中的P38、ERK1、ERK2、JNK1、JNK2的表达情况。结果：(1)细胞形态学观察：光镜下可见对照组细胞胞体发出较多长且有分支的突起,呈形态多样的梭形、多边形交织排列的网状结构,折光性强,轮廓清晰；损伤组在光镜下可见部分细胞皱缩成团,胞体突起连接中断有些甚至出现细胞脱落的现象,细胞的正常结构发生改变,胞质内出现颗粒、空泡；保护组可见细胞呈现比较清晰的轮廓,胞体皱缩和突起回缩均减弱,细胞逐渐均匀分布不再聚集在一起,细胞脱落情况减轻,连接的突起出现中断的现象减弱,胞质内颗粒和空泡的数目减少。(2)Western Blot检测蛋白表达：损伤组与对照组进行比较,损伤组ERK1的表达升高(P0.05)保护组与损伤组进行比较：P38的表达增加(P0.05),ERK1表达下降(P0.05)；其余各组进行比较P0.05,无统计学差异。结论：(1)庆大霉素可能通过激活ERK1途径对海马星形胶质细胞产生毒性作用。(2)aFGF能够保护庆大霉素损伤的星形胶质细胞。(3)MAPK信号转导通路可能在aFGF对庆大霉素诱导的海马星形胶质细胞的保护作用过程中起作用,通过P38和ERK1信号分子进行表达。而aFGF对抗庆大霉素诱导的海马星形胶质细胞的损伤机制可能与ERK2、JNK1/2信号分子无关。
【关键词】：aFGF MAPK 星形胶质细胞 保护 机制
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R96
【目录】：

• 个人简历3-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-12
• 材料与方法12-30
• 结果30-36
• 讨论36-44
• 小结44-45
• 参考文献45-52
• 英文缩略词索引52-54
• 综述54-76
• 参考文献68-76
• 致谢76-78
• 硕士学位期间发表的学术论文78

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本文编号：1023294