利用酶法制备菲律宾蛤仔抗肿瘤肽的研究

发布时间：2017-10-21 02:40

  本文关键词：利用酶法制备菲律宾蛤仔抗肿瘤肽的研究

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【摘要】：为确定酶解法提取菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)抗肿瘤活性多肽的最佳工艺条件,选用5种蛋白酶在相同的料液比、酶解时间和酶添加量、各自最适温度和pH的条件下酶解菲律宾蛤仔。通过甲醛电位滴定法和Cell counting kit-8(CCK-8)方法分别测定了菲律宾蛤仔酶解液氨基态氮含量和酶解多肽的抗肿瘤活性,分析了氨基态氮含量与A549抑制率之间的相关性。在单因素试验的基础上,以人非小细胞肺癌A549抑制率为指标,正交分析优化酶解工艺条件。结果显示,菲律宾蛤仔的5种酶解产物中,风味蛋白酶的酶解液中氨基态氮含量最高,而胃蛋白酶获得的酶解多肽抗肿瘤活性最高。胃蛋白酶酶解菲律宾蛤仔正交实验确定酶解最佳工艺条件为:料液比(w/w)1∶1,pH 2.0,酶解时间1 h,酶添加量2 000 U/g,酶解温度37℃。当设定最佳酶解工艺获得的酶解多肽浓度为20 mg/m L时,其对A549的抑制率为99.83%。研究表明,酶的种类对菲律宾蛤仔酶解液氨基态氮含量和酶解多肽的抗肿瘤活性有较大影响,菲律宾蛤仔酶解液中氨基态氮含量与A549抑制率没有直接的正相关性。
【作者单位】： 华侨大学生物化工学院;福建省水产研究所国家海水鱼类加工技术研发分中心福建省海洋生物增养殖与高值化利用重点实验室福建省海洋生物资源开发利用协同创新中心;
【关键词】： 菲律宾蛤仔 酶解多肽 A 抗肿瘤活性
【基金】：福建省科技重大专项(2014NZ0001-1) 福建省海洋高新产业发展专项([2013]014) 依托平台福建省海洋经济创新发展区域示范项目(2014FJPT01) 厦门南方海洋研究中心项目(14PZY017NF17) 海洋经济创新发展区域示范项目(12PYY001SF08)
【分类号】：R943
【正文快照】： 非小肺癌目前的发病率较高[1-4]。近年来,随着生物分离纯化技术的发展,人们不断发现具有抑制非小肺癌增殖的天然化合物。如:黄大川等[5]从僧帽牡蛎中提取出一种具有抑制A549细胞增殖作用的低分子活性肽BPO-L;孟翠丽等[6]发现雷氏大疣蛛毒素具有较强的细胞毒性,可直接杀死A549，

本文编号：1070847