重组人胰高血糖素样肽-1类似物的分离纯化和鉴定

发布时间：2017-10-21 19:29

  本文关键词：重组人胰高血糖素样肽-1类似物的分离纯化和鉴定

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【摘要】：将合成的人胰高血糖素样肽-1[recombinant human glucagon-like peptide-1(7~37),rhGLP-1]类似物基因插入到原核表达质粒pGEX-4T-3中,构建成rhGLP-1类似物与谷胱甘肽巯基转移酶(glutathione-S-transferases,GST)的融合表达载体pGEX-rhGLP-1类似物,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得重组菌株。IPTG诱导表达的菌体经高压均质机破碎后,离心收集包涵体,经尿素变性、Glutathione-Sepharose 4B亲和层析、肠激酶酶切、SP-Sepharose FF层析和反相层析RP-C18脱盐后冻干,得到纯度大于96%的rhGLP-1类似物,经质谱测定,分子量与理论值一致。生物学活性分析表明,rhGLP-1类似物具有促进表达有GLP-1受体的HEK293细胞c AMP增加的活性。
【作者单位】： 广东东阳光药业有限公司;
【关键词】： 重组人胰高血糖素样肽- 融合蛋白 纯化 生物学活性
【基金】：广东省引进创新科研团队计划资助项目(201101Y0104990178)
【分类号】：R914
【正文快照】： 人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是一种生理性肽类肠道激素,胰高血糖素原在肠粘膜L细胞内被酶解为含37个氨基酸残基的GLP-1(1~37)。GLP-1(l~37)不具有生物活性,需进一步水解切除N末端6个氨基酸残基后成为具有生物学活性的GLP-1(7~37),在摄入葡萄糖或进食数分钟后释放[1]。GLP-1的主

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本文编号：1074929