停流荧光法研究牛血清白蛋白和叶酸反应动力学

发布时间：2017-11-04 11:17

  本文关键词：停流荧光法研究牛血清白蛋白和叶酸反应动力学

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【摘要】：叶酸属于B族维生素,作为生物体内转移一碳单位酶系中的辅酶,与其他维生素相互作用,共同维持体内红细胞的稳定,对氨基酸之间的转化、细胞的分裂生长,蛋白质合成的反应都有重要意义。药物半衰期、峰浓度和反应速度常数是研究药代动力学的重要参数,实验运用荧光分光光度计和停流光谱分析仪研究了仿生环境下牛血清白蛋白和叶酸反应的动力学参数,为叶酸相关的药物代谢参数提供参考。结果表明:利用Stern-Volmer方程处理荧光猝灭实验数据,得到25,30和37℃下叶酸对牛血清白蛋白内源荧光的静态猝灭常数分别为2.455×10~(10),4.900×10~(10)和6.427×10~(10) L·mol~(-1)·s~(-1);动力学反应速率常数的计算结果表明不同温度、pH值和缓冲介质下BSA和叶酸反应的速率常数都大于100mol·L~(-1)·s~(-1),阐明了BSA与叶酸之间的猝灭机理是通过形成复合物的静态猝灭过程;生理温度下,牛血清白蛋白浓度与其初始浓度满足二级反应公式,相关系数为0.998 7,药代半衰期t_(1/2)为0.059s;反应的表观速率常数随着叶酸浓度的增加呈线性增加趋势,且叶酸催化牛血清白蛋白荧光猝灭的速率常数k_(cat)=3.174×10~5 mol·L~(-1)·s~(-1)。此外还测定了不同缓冲介质下牛血清白蛋白与叶酸相互作用的表观速率常数和反应速率常数,以此来探讨生理介质对于二者反应的影响,为确定临床用药方案、预测药物的疗效和毒性以及合理用药有着重要意义。
【作者单位】： 北京工业大学生命科学与生物工程学院;包头出入境检验检疫局;中国检验检疫科学研究院;
【基金】：北京市教育委员会科技计划面上项目(KM201210005032) 北京市自然科学基金项目(2102005)资助
【分类号】：R961;O657.3
【正文快照】： 引言叶酸是一种水溶性维生素,它能传递一碳基团(甲基或甲酰)给脱氧尿苷酸,使之变为脱氧胸苷酸,进而合成DNA。叶酸的缺少会增加未成熟细胞量,使白血球减少,从而导致红血球的异常,引起贫血、心脏病、老年性痴呆及胎儿神经软管缺陷等疾病[1-3]。叶酸进入机体后,和各种生物分子结

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