抗肿瘤肽的设计及其活性和作用机理的研究

发布时间：2017-11-06 06:27

  本文关键词：抗肿瘤肽的设计及其活性和作用机理的研究

  更多相关文章： 抗肿瘤多肽的设计 自组装 抗癌机理

【摘要】：癌症一直以来危害着全球人类的健康,每年造成许多人死亡。过去传统的癌症治疗方法,比如放、化疗和传统的抗癌药物,尽管取得了重大进展,但对人类身体仍然有严重的副作用。所以近年来,许多科学家将抗癌药物的研究重点放在了不良反应少、活性高、不容易产生耐药的多肽药物上。同时,抗肿瘤肽(ACPs)也有不足之处,主要有两点,一是容易被血液中的一些蛋白酶水解或者被内皮系统吸收,导致稳定性差。二是多肽的选择性弱,容易对人体正常的活细胞会有一些毒副作用。药物的设计思路对ACPs的抗肿瘤活性、稳定性、选择性有重要影响。通过氨基酸序列的设计,可以筛选出抗肿瘤活性极好的多肽。在母药的基础上,设计添加靶向肽段,设计双亲性自组装多肽,可以提高抗肿瘤多肽的稳定性和靶向性。本文对设计的抗肿瘤活性多肽(LA-2和IL多肽系列)的抗癌活性与其杀死肿瘤细胞的机理做了一定研究。I-L氨基酸对在多肽抗肿瘤活性中起着重要作用。以ZXR-2为母板设计一系列突变多肽(IL系列,ZXR-3),这些多肽内存在I-L氨基酸对,类似于亮氨酸拉链结构。亮氨酸与异亮氨酸都是疏水性氨基酸,相差七个氨基酸。当多肽与疏水性细胞膜接触时,不同多肽的异亮氨酸I和亮氨酸L相互作用形成类似亮氨酸拉链结构,有助于多肽在细胞膜上的聚集,产生杀死细胞毒性。通过MTT细胞毒性试验验证了I-L氨基酸对在细胞毒性有重要影响。KI的荧光猝灭实验以及多肽与细胞膜相互作用表面压力的测定,我们确定ZXR-2多肽从C端插入,插膜深度在W11位,并推断了ZXR-2(抗肿瘤肽)的作用机理。设计的LA-2(CRGDKGPDCGKAFRRFLGALFKALSHLL)为靶向抗肿瘤肽,分为三个部分,包括靶向肽段,连接肽段和功能肽。CRGDKGPDC为靶向肽段。靶向过表达的膜蛋白整合素αvβ3,连接肽段序列为GKAFRR,在肿瘤特异蛋白酶人激肽释放酶2(hK2)存在的情况下被水解断裂,分离出有抗癌活性的母药。利用扫描电镜和透射电镜,发现LA-2能在水环境下自组装形成纳米级的胶束。通过LB膜分析仪测定其临界胶束浓度,利用血清稳定性实验和蛋白酶解实验说明自组装的LA-2更加稳定。酶切位点实验验证hK2酶可以特异性酶切多肽释放母药。通过细胞毒性实验MTT,验证了LA-2多肽的靶向性。设计的抗肿瘤多肽,具有多重靶向性,并有较好的血清稳定性,因此具有极高的应用潜力。
【学位授予单位】：北京化工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R91

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 曾名嘉;张冬梅;陈钧辉;;抗肿瘤多肽研究进展[J];中国生化药物杂志;2007年02期

，

本文编号：1147742