储存血小板中血小板微粒的来源、制备及功能初探

发布时间：2017-11-20 21:09

  本文关键词：储存血小板中血小板微粒的来源、制备及功能初探

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【摘要】：目的从手工浓缩血小板中制备血小板微粒(PMP),并探索PMP的止凝血功能及来源。方法取常规储存第1、3、5、7、9、11天的浓缩血小板,流式细胞仪检测CD61抗体标记的样本中PMP含量。低速离心(20℃ 2500×g、30min)储存第1、8、15、22、29天的浓缩血小板,下层沉淀用于检测离心对血小板CD62p及磷脂酰丝氨酸(PS)表达的影响；上层液高速离心(20 ℃,15000×g、45min)获得PMP。对离心获取的PMP颗粒理化性质和功能进行检测,包括：颗粒大小、膜表面蛋白受体和PS、凝血酶生成能力。PMP的来源研究采取分析储存血小板生理状态的方法：取储存第0、1、3、5、7、9、11天的浓缩血小板,以CD62p作为血小板活化状态指标、以△Ψm和PS作为血小板凋亡状态指标,利用流式细胞仪检测血小板各项指标的表达。结果常规储存9天起浓缩血小板中PMP含量显著增加,且离心剪切力对其获取无影响；制备储存第9天的PMP,经研究发现其大小不均一,表面含有GPIba (CD42b)、GPⅡb-Ⅲa (CD41/CD61)、P-选择素(CD62p)以及PS,具有体外促进凝血酶生成的功能；此外,血小板活化与凋亡指标检测发现,储存5天后的血小板开始进入了高度活化和凋亡状态。结论储存9天的浓缩血小板开始显著释放PMP,可通过离心方法直接获取；制备的PMP表面保留了与止凝血功能相关的糖蛋白和PS,表现出止血功能；这种具止凝血功能的PMP来源于发生高度活化和凋亡的血小板。
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R977.8

【参考文献】

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本文编号：1208508