1-苯基-2-硫脲抑制flk1型斑马鱼黑色素生成的最佳浓度

发布时间：2017-11-29 07:26

  本文关键词：1-苯基-2-硫脲抑制flk1型斑马鱼黑色素生成的最佳浓度

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【摘要】：【目的】探讨1-苯基-2-硫脲(PTU)对抑制血管荧光转基因型flk1斑马鱼黑色素生成的能力,探索在不影响斑马鱼正常生长发育条件下,能保持斑马鱼透明性的最佳浓度。【方法】用0.0125~1.0 mmol/L浓度区间的PTU与24 hpf(hours post fertilization)斑马鱼胚胎共同孵育,观测PTU抑制黑色素生成情况,通过观察斑马鱼形态学变化、记录80 hpf后的孵化率和死亡率、测量心率和静脉窦-动脉球间距等生理学变化,评价PTU处理对斑马鱼生长发育的影响。【结果】随着PTU浓度的增加,黑色素抑制能力增强,毒性逐渐增加,表现为斑马鱼死亡率增加、孵化率下降、心率下降、静脉窦-动脉球之间的距离增大。浓度为0.0125-0.025 mmol/L的PTU对斑马鱼活性基本无影响,浓度≥0.05 mmol/L的PTU能完全抑制黑色素的生成。当PTU浓度为0.025 mmol/L时,生成的黑色素不影响斑马鱼血管观察,当PTU浓度为0.05 mmol/L时,斑马鱼的心率和静脉窦-动脉球间距基本不受影响。【结论】对于72 hpf前的flk1型斑马鱼实验,应根据具体实验要求,在浓度≤0.05 mmol/L范围内选择适当的PTU浓度,使黑色素的生成既不影响实验观察和信号检测,同时对生长发育的影响减至最小。
【作者单位】： 中山大学附属第一医院卫生部辅助循环重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金(81371665;81571015) 广东省科技计划国际合作项目(2013B051000017)
【分类号】：R965
【正文快照】： 斑马鱼是一种高度发达的脊椎模式生物,与人类在发育过程、器官构造、疾病生理和基因序列等方面高度相似,因此被广泛用于现代遗传学、发育生物学、药物研发/筛选和人类疾病模型等研究领域[1-3]。斑马鱼用于生物医学领域研究的主要优势为:体积小、饲养成本低、生殖周期短、繁殖

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1 常嘉;陆亮;王庆利;常艳;马t，

本文编号：1236665