丹参对氯沙坦药代动力学影响及其在中药与西药相互作用中的意义

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丹参对氯沙坦药代动力学影响及其在中药与西药相互作用中的意义

     论文目录

摘要第1-12页

ABSTRACT第12-15页

缩略词表第15-16页

前言第16-21页

第一部分 丹参对氯沙坦药代动力学的影响第21-93页

 一、大鼠血浆中氯沙坦及其代谢物的HPLC-MS测定方法的建立第21-41页

  (一) 仪器与试药第21-22页

   1、仪器第21页

   2、试药第21-22页

  (二) 方法与结果第22-39页

   1、分析条件第22页

    (1) 色谱条件第22页

    (2) 质谱条件第22页

   2、标准溶液的配制第22-23页

    (1) 氯沙坦标准溶液的配制第22页

    (2) 代谢物EXP3174标准溶液的配制第22页

    (3) 氯沙坦和代谢物EXP3174混合标准溶液的配制第22-23页

    (4) 厄贝沙坦内标标准溶液的配制第23页

   3、血浆样品处理方法第23页

   4、血浆样品分析方法验证第23-39页

    (1) 方法特异性第23-24页

    (2) 标准曲线与线性范围第24-26页

    (3) 定量限与检测限第26-27页

    (4) 精密度实验第27-32页

    (5) 准确度实验第32-33页

    (6) 基质效应及提取回收率第33-35页

    (7) 稳定性考察第35-37页

    (8) 测定方法的质量控制第37-39页

  (三) 讨论第39-40页

  (四) 小结第40-41页

 二、单次给药大鼠氯沙坦片及与丹参片、丹参酮ⅡA、丹参多酚酸盐合用后氯沙坦的药代动力学研究第41-68页

  (一) 仪器试药与试验方案第41-42页

   1、仪器第41页

   2、试药第41页

   3、实验动物第41页

   4、给药方案及取血第41-42页

   5、血浆样品预处理与分析第42页

   6、数据处理第42页

  (二) 实验结果第42-64页

   1、单次给药大鼠氯沙坦片后氯沙坦和代谢物EXP3174的血药浓度-时间数据第42-47页

    (1) 单次给药大鼠氯沙坦片后氯沙坦的血药浓度-时间数据第42-44页

    (2) 单次给药大鼠氯沙坦片后EXP3174的血药浓度-时间数据第44-45页

    (3) 药代动力学参数第45-47页

   2、单次给药大鼠氯沙坦片与丹参片后的血药浓度-时间数据第47-51页

    (1) 单次给药大鼠氯沙坦片与丹参片后氯沙坦的血药浓度-时间数据第47-48页

    (2) 单次给药大鼠氯沙坦片与丹参片后EXP3174的血药浓度-时间数据第48-50页

    (3) 药代动力学参数第50-51页

   3、单次给药大鼠氯沙坦片与丹参酮IIA后的血药浓度-时间数据第51-56页

    (1) 单次给药大鼠氯沙坦片与丹参酮ⅡA后氯沙坦的血药浓度-时间数据第51-53页

    (2) 单次给药大鼠氯沙坦片与丹参酮ⅡA后EXP3174的血药浓度时间数据第53-55页

    (3) 药代动力学参数第55-56页

   4、单给药大鼠氯沙坦片与丹参多酚酸盐后的血药浓度-时间数据第56-61页

    (1) 单次给药大鼠氯沙坦片与丹参多酚酸盐后氯沙坦的血药浓度时间数据第56-58页

    (2) 单次给药大鼠氯沙坦片与丹参多酚酸盐后EXP3174的血药浓度-时间数据第58-59页

    (3) 药代动力学参数第59-61页

   5、结果比较第61-64页

    (1) 氯沙坦的血药浓度-时间曲线及药代动力学参数第61-62页

    (2) EXP3174的血药浓度-时间曲线及药代动力学参数第62-64页

  (三) 讨论第64-67页

  (四) 小结第67-68页

 三、长期给药大鼠氯沙坦片及与丹参片、丹参酮ⅡA、丹参多酚酸盐合用后氯沙坦的药代动力学研究第68-93页

  (一) 仪器试药及试验方案第68-69页

   1、仪器第68页

   2、试药第68页

   3、实验动物第68页

   4、给药方案及取血第68-69页

   5、血浆样品预处理与分析第69页

   6、数据处理第69页

  (二) 实验结果第69-90页

   1、长期给药大鼠氯沙坦片后氯沙坦和代谢物EXP3174的血药浓度-时间数据第69-74页

    (1) 长期给药大鼠氯沙坦片后氯沙坦的血药浓度-时间数据第69-71页

    (2) 长期给药大鼠氯沙坦片后EXP3174的血药浓度-时间数据第71-72页

    (3) 药代动力学参数第72-74页

   2、长期给药大鼠氯沙坦片与丹参片后的血药浓度-时间数据第74-78页

    (1) 长期给药大鼠氯沙坦片与丹参片后氯沙坦的血药浓度-时间数据第74-75页

    (2) 长期给药大鼠氯沙坦片与丹参片后EXP3174的血药浓度-时间数据第75-77页

    (3) 药代动力学参数第77-78页

   3、长期给药大鼠氯沙坦片与丹参酮ⅡA后的血药浓度-时间数据第78-83页

    (1) 长期给药大鼠氯沙坦片与丹参酮ⅡA后氯沙坦的血药浓度-时间数据第78-80页

    (2) 长期给药大鼠氯沙坦片与丹参酮ⅡA后EXP3174的血药浓度-时间数据第80-81页

    (3) 药代动力学参数第81-83页

   4、长期给药大鼠氯沙坦片与丹参多酚酸盐后的血药浓度-时间数据第83-87页

    (1) 长期给药大鼠氯沙坦片与丹参多酚酸盐后氯沙坦的血药浓度时间数据第83-84页

    (2) 长期给药大鼠氯沙坦片与丹参多酚酸盐后EXP3174的血药浓度-时间数据第84-86页

    (3) 药代动力学参数第86-87页

   5、结果比较第87-90页

    (1) 氯沙坦的血药浓度-时间曲线及药代动力学参数第87-88页

    (2) EXP3174的血药浓度-时间曲线及药代动力学参数第88-90页

  (三) 讨论第90-92页

  (四) 小结第92-93页

第二部分 丹参活性成分对介导氯沙坦代谢的细胞色素P450酶的影响第93-124页

 (一) 材料和试剂第96-98页

  1、主要材料第96页

  2、主要试剂第96-97页

  3、主要仪器第97-98页

 (二) 方法第98-109页

  1、Chang Liver细胞的体外培养、复苏、传代及冻存第98-101页

   (1) 溶液配制第98页

   (2) 细胞复苏第98-99页

   (3) 细胞计数第99-100页

   (4) 细胞培养第100页

   (5) 细胞传代第100页

   (6) 细胞冻存第100-101页

  2、MTT法检测不同浓度丹酚酸B和丹参酮ⅡA对Chang liver细胞增殖的影响第101-102页

  3、半定量RT-PCR检测CYP2C9和CYP3A4的表达水平第102-105页

   (1) RNA提取相关试剂的配制第102-103页

   (2) 提取细胞总RNA第103页

   (3) RNA的定量第103页

   (4) 逆转录合成cDNA第103-105页

   (5) PCR产物电泳分析第105页

  4、Western Blot检测CYP2C9和CYP3A4蛋白的表达水平第105-109页

   (1) 收集细胞提取蛋白第105-106页

   (2) 核蛋白、质蛋白的保存第106页

   (3) 试剂配制及蛋白质分子量标准(Marker)第106-107页

   (4) SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳第107-108页

   (5) 转移第108页

   (6) 染色第108页

   (7) 封闭、孵育一抗第108-109页

   (8) 洗膜,孵育二抗、洗涤第109页

   (9) 显色曝光及分析结果第109页

  5、统计学方法第109页

 (三) 结果第109-121页

  1、MTT法检测丹酚酸B对Chang Liver细胞增殖的影响第109-110页

  2、MTT法检测丹参酮ⅡA对Chang Liver细胞增殖的影响第110-111页

  3、RT-PCR检测CYP3A4和CYP2C9mRNA的表达结果第111-116页

   (1) 丹酚酸B对Chang Liver细胞的mRNA表达的影响第111页

   (2) 丹参酮Ⅱ A对Chang Liver细胞的mRNA表达的影响第111-116页

  4、western blot检测CYP3A4和CYP2C9蛋白的表达结果第116-121页

   (1) 丹酚酸B对Chang Liver细胞的蛋白表达的影响第116页

   (2) 丹参酮ⅡA对Chang Liver细胞的蛋白表达的影响第116-121页

 (四) 讨论第121-123页

 (五) 小结第123-124页

结论第124-125页

参考文献第125-131页

在读期间发表文章第131-132页

致谢第132页

论文编号BS2092621，，这篇论文共132页
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