左炔诺孕酮纳米载药缓释复合材料对胚胎粘附及精子影响的实验研究

发布时间：2017-12-20 04:35

  本文关键词：左炔诺孕酮纳米载药缓释复合材料对胚胎粘附及精子影响的实验研究　出处：《扬州大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：一、目的和意义通过研究左炔诺孕酮纳米载药缓释聚乳酸(PLA)-聚苯乙烯(PS)复合材料对体外胚胎粘附和精子形态与功能的影响,初步评价左炔诺孕酮纳米载药缓释聚乳酸-聚苯乙烯生物材料的有效性和安全性,为左炔诺孕酮纳米载药缓释复合材料可能作为一种安全有效的新型生物可降解纳米载药宫内节育系统提供实验依据。二、方法1、建立Ishikawa单层细胞(人子宫内膜癌细胞)和Bewo细胞(人绒毛膜癌细胞)球状体共培养模型。2、观察左炔诺孕酮纳米载药缓释复合材料对Bewo球状体在Ishikawa单层细胞上的粘附和铺展功能的影响：(1)在共培养体系中分别加入空载药膜缓释液和载药膜缓释液,以未加膜缓释液的共培养模型为空白对照组,计算Bewo球状体在Ishikawa单层细胞上的粘附率及铺展率；(2)CCK8方法检测空载药膜和载药膜对Ishikawa细胞增殖率的影响；(3)Real time RT-PCR方法检测各组Ishikawa细胞整合素αv的mRNA表达改变。3、观察左炔诺孕酮纳米载药缓释复合材料对人精子形态和功能的影响：(1)经密度梯度离心处理后正常生育男性精液分别与空载药膜和载药膜共培养,用计算机辅助精液分析(CASA)检测精子活力;(2)透射电镜下观察是空载药膜组和载药膜组精子形态的变化。三、结果1、载药膜组Bewo细胞球状体的粘附率和平均铺展直径均降低,载药膜组Ishikawa细胞整合素αv的mRNA表达水平下降,同空载药膜组和空白对照组相比差异均有显著统计学意义(P0.05),空载药膜组同空白对照组相比,差异均无显著统计学意义(P0.05);2、空载药膜组、载药膜组与空白对照组相比,Ishikawa细胞增殖率均无显著的统计学差异(P0.05)；3、空白对照组、空载药膜组和载药膜组精子活力和活率差异无明显统计学意义(P0.05),空载药膜组精子的超微结构与空白对照组无明显差别;4、载药膜组精子的顶体波浪状改变,顶体缺损或消失,质膜溶解,线粒体空泡样变,凋亡精子及崩解精子与空载膜组及对照组比较明显增加。四、结论1、聚乳酸-聚苯乙烯生物可降解材料(空载药膜)不影响体外胚胎的粘附,不影响人子宫内膜细胞的增殖,材料本身具有一定的生物安全性；2、左炔诺孕酮纳米载药聚乳酸-聚苯乙烯缓释复合材料(载药膜)能够抑制体外胚胎的粘附,具有明显的抗着床作用；3、聚乳酸-聚苯乙烯生物可降解材料(空载药膜)本身对人精子活力及精子超微结构无明显影响；4、左炔诺孕酮纳米载药聚乳酸-聚苯乙烯缓释复合材料(载药膜)可使精子顶体缺损或消失,质膜溶解,线粒体空泡样变,引起精子裂解和凋亡,具有一定的精子杀伤作用；5、本课题研究为左炔诺孕酮纳米载药聚乳酸-聚苯乙烯缓释复合材料的生物安全性和有效性评价提供实验依据,为左炔诺孕酮纳米载药聚乳酸(PLA)-聚苯乙烯(PS)复合材料可能成为新一代的宫内节育系统支架材料提供研究基础。
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R943;R96

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本文编号：1310796