对乙酰氨基酚对大鼠原代肝细胞及BRL-3A细胞的毒性作用比较

发布时间：2017-12-23 00:06

本文关键词：对乙酰氨基酚对大鼠原代肝细胞及BRL-3A细胞的毒性作用比较　出处：《药物评价研究》2016年03期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的建立大鼠原代肝细胞提取鉴定体系,比较对乙酰氨基酚(APAP)对大鼠原代肝细胞和永生化细胞BRL-3A的毒性作用。方法采用胶原酶原位两步灌流法提取大鼠原代肝细胞,通过过碘酸雪夫染色(PAS)和肝细胞双核结构进行鉴定;CCK 8法测定APAP对大鼠原代肝细胞及BRL-3A细胞毒性作用的IC50;光学显微镜透射电镜观察APAP对2种细胞的损伤情况;全自动生化分析仪测定细胞上清AST、ALT、LDH、ALP、ALB、BUN、TP、GLU 8项生化指标的变化。结果PAS糖原染色鉴定获取的大鼠原代肝细胞,双核结构,细胞存活率浮动在80%~95%;最佳接种密度为60 000/cm2,在第3~5天为对数生长期;APAP作用于大鼠原代肝细胞24 h的IC50为18.03 mmol/L,95%置信区间为(17.28~18.81)mmol/L,作用于BRL-3A的IC_(50)为20.05 mmol/L,95%置信区间为(18.99~21.17)mmol/L;透射电镜结果显示,在30 mmol/L APAP作用下,2种细胞细胞器肿胀,核膜破裂,细胞膜边界模糊不清;与对照组比较,大鼠原代肝细胞分泌的天冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素氮(BUN)、葡萄糖(GLU)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)随着APAP浓度增加产生显著变化,而BRL-3A细胞几乎所有的酶学指标变化均差异不显著。结论与永生化细胞BRL-3A比较,大鼠原代肝细胞更能体现药物的肝脏毒性作用,但其体外培养存活时间较短;BRL-3A细胞缺少肝脏重要酶类,增加细胞内肝脏酶类是提升其作为肝脏毒性筛选模型的更好手段之一。
【作者单位】：广东药科大学药科学院;军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室国家北京药物安全评价研究中心;
【基金】：重大新药创制科技重大专项(2013ZX09302303,2012ZX09301-001-008) 北京市科委基金项目(Z131100006513010)
【分类号】：R961
【正文快照】： 2.军事医学科学院毒物药物研究所,抗毒药物与毒理学国家重点实验室,国家北京药物安全评价研究中心,北京100850药物肝毒性是新药开发过程中临床实验阶段失败的主要原因,也是药物上市后撤回的原因之一[1]。据统计约有三分之二的进入临床实验的药物因其肝毒性而不得不终止开发,其

【参考文献】