羰基氰氯苯腙调节非经典自噬的机制研究

发布时间：2017-12-30 04:02

  本文关键词：羰基氰氯苯腙调节非经典自噬的机制研究　出处：《中国生化药物杂志》2016年04期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的探讨可以调控羰基氰氯苯腙(carbonyl cyanide m-chlorophenylhydrazone,CCCP)诱导的不依赖自噬关键基因的非经典自噬的影响因素。方法分别将野生型细胞和自噬关键基因敲除/敲低的细胞(Atg5-KO MEF,FIP-200 KO MEF,ULK1-KO MEF,Beclin 1-KO U251)用CCCP处理,观察GFP-LC3的分布聚集情况和LC3蛋白水平的表达。荧光定量PCR检测CCCP处理后LC3B mRNA水平变化。Western blot检测FIP200-KO MEF中CCCP处理时,水通道蛋白抑制剂对LC3蛋白水平的影响。结果在Atg5-KO MEF细胞中,和对照组相比,CCCP处理组免疫荧光实验不能产生GFP-LC3自噬斑点,Western blot结果显示LC3-I型不能转变为LC3-II。而在ULK1-KO MEF,FIP200-KO MEF,及Beclin1-KD U251细胞中,CCCP处理组免疫荧光实验能产生GFP-LC3自噬斑点,同时LC3-I型也能转变为LC3-II型。但CCCP处理不影响LC3B的mRNA水平。CCCP诱导的非经典自噬能被水通道蛋白抑制剂所抑制。结论 CCCP诱导的非经典自噬需要自噬关键基因Atg5参与,但不需要Beclin 1,ULK1,FIP200的参与,不影响LC3B的转录调控。渗透压不平衡可以调节CCCP诱导的自噬。
[Abstract]:......
【作者单位】： 中山大学药学院/新药成药性评估与评价国家与地方联合工程实验室;
【基金】：广东省自然科学基金(S2013010015876) 博士点基金(20130171120049)
【分类号】：R96
【正文快照】： 自噬(巨自噬)是对细胞内衰老细胞器、长寿命蛋白以及外源病原微生物进行吞噬然后与溶酶体融合并降解内含物的过程,其在进化过程中具有高度保守性[1]。已有大量研究报道自噬与肿瘤、神经退行性疾病、感染免疫等多种疾病密切相关[1-3]。近年来发现自噬体的形成可以不经过某些经

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本文编号：1353216