新型肺靶向DTX-LP的药代动力学研究及评价

发布时间：2018-01-13 18:37

本文关键词：新型肺靶向DTX-LP的药代动力学研究及评价　出处：《重庆医科大学》2017年博士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：肺癌是一种最常见的恶性肿瘤。近年来,肺癌的发病率和死亡率在全球都呈现出惊人的增长态势。在中国,肺癌已取代肝癌成为首位恶性肿瘤死亡原因,其中非小细胞肺癌(NSCLC)占全部肺癌总发病率的80%左右。目前,临床上NSCLC的化疗常用方案选择用铂类、紫杉醇或多烯紫杉醇(docetaxel,DTX)等抗癌药物,但由于缺乏靶向性而用药量大,加之溶媒容易导致较大的毒副作用,限制了这些药物的使用。因此,较理想的治疗策略就是研发具有肺靶向的制剂。本课题组选择脂质体技术,以DTX作为模型药物,采用固体分散技术和水化技术相结合研制的新型多烯紫杉醇脂质体(docetaxel liposome,DTX-LP),经研究能将DTX主要传递至肺部,从而显著提高了DTX的疗效、降低全身毒副作用,基本上解决了脂质体肺靶向给药的关键科学问题。为此,本课题组以DTX注射液(docetaxel injection,DTX-IN)为参照,拟研究DTX-LP的药代动力学行为,主要探讨具有肺靶向性DTX-LP的代谢情况。目的本文以DTX-IN作为参照,在肺靶向下,考察新型DTX-LP在兔药代动力学参数、组织分布、代谢及排泄等方面的异同。探讨肺靶向对DTX药代动力学的影响,阐明新型DTX-LP的药代动力学规律,并进行初步的安全性和疗效方面的评价。方法1.建立兔血浆、尿液和粪便样品中DTX含量测定的UPLC-MS/MS分析方法,并进行方法学验证。2.建立兔血浆和组织样品中DTX含量测定的RP-HPLC分析方法,并进行方法学验证。3.采用UPLC-MS/MS方法测定给药后一定时间点的DTX兔血药浓度,运用DASver2.0软件进行分析和拟合,获取相关药代动力学参数。4.采用HPLC方法测定给药后不同时间点兔体内主要组织器官的DTX浓度,考察组织分布,并评价DTX-LP的肺靶向性。5.将DTX-LP与兔肺匀浆、兔肝匀浆和兔肝微粒体在体外共孵育,考察其体外代谢情况。将DTX-LP注入兔体内,考察其体内代谢情况。6.采用UPLC-MS/MS方法测定兔给药后不同时间间隔尿液和粪便中DTX含量,考察排泄量和排泄率。结果1.建立了兔血浆、尿液和粪便样品中DTX含量的UPLC-MS/MS测定方法。该方法专属性强,灵敏度高;相对回收率均在88.3%~109.4%范围内,提取回收率均≥81.3%;日内、日间精密度RSD均≤11.3%,能够满足生物样品的分析要求。2.建立了兔血浆和组织样品中DTX含量的RP-HPLC测定方法。该方法专属性强,杂质峰少,且不影响DTX的测定;相对回收率均在86.2%~118.0%范围内,提取回收率均≥78.8%;日内、日间精密度RSD均≤10.9%,能够满足生物样品的分析要求。3.将DTX-LP和DTX-IN分别静脉注入兔体内后,两种制剂的药代动力学行为均符合三室模型,相应的AUC(0-t)、分布半衰期t1/2α、消除半衰期t1/2β分别为1.009mg/L·h、0.024h、1.53h和1.963mg/L·h、0.057h、0.465h。其中,DTX-LP的t1/2α显著缩短,约为DTX-IN的0.42倍,这表明DTX-LP能快速从体循环中分布到靶器官;而t1/2β显著延长,约为DTX-IN的3.3倍,则有利于发挥DTX在体内的抗癌作用。同时,DTX-LP的血浆清除率CL为0.636L/h·kg,是DTX-IN的1.64倍,这也表明DTX-LP更容易从血液循环中消除,而进入到靶器官肺中。4.确证了DTX-LP具有高度的肺靶向性。在注射0.5h,DTX-IN在兔体内的DTX浓度从高到低的顺序依次为肾、脾、肝、心、肺、胃和脑,其中肺部药物浓度仅为3.124μg/g。此时,DTX-LP的肺部DTX浓度则高达58.657μg/g(二者相差约19倍),同时,明显高于其他组织,这使得肺部的DTX浓度显著增加,而明显降低了血液、心、肾、胃的DTX浓度,有利于降低DTX在这些部位的毒副作用。DTX-LP组肺组织的靶向指数TI值为11.77;总靶向效率TE值为61.26%;重量-总靶向效率TQe值为52.83%,与DTX-IN相比,DTX-LP提高了DTX在肺组织的TQe值达到8.5倍之多,这表明DTX-LP具有高度的肺靶向性。5.针对本课题研究需要,提出了兔肺匀浆的DTX药物代谢研究理念。经试验发现,DTX-LP和DTX-IN两种制剂在兔肺匀浆中基本不代谢;在肝匀浆中的DTX含量分别下降了29.1%和38.0%,在肝微粒体中的DTX含量分别下降了23.7%和23.9%;在体外兔肝匀浆孵育时,找到两种代谢产物,其中一种结构与已知代谢产物M-2相符,另一种Mun-1(分子量821)是一种新的代谢产物;在DTX-LP与DTX-IN两种制剂的兔体内代谢中发现代谢产物9种,其中已知代谢产物4种,即为M-1、M-2、M-3和M-4,新的代谢产物5种,即为Mun-1、Mun-2、Mun-3、Mun-4和Mun-5。DTX-LP和DTX-IN两种制剂在兔体内的代谢基本一致。6.给药后0-48h内DTX-LP组从粪便和尿液中排出的DTX的排泄量分别为183.9μg和7.21μg,累积排泄率分别为9.2%和0.36%;而DTX-IN粪便和尿液的排泄量分别为359.0μg和13.0μg,累积排泄率分别为17.9%和0.65%。无论粪便还是尿液的累积排泄量和排泄率,DTX-LP组均显著低于DTX-IN组。结论本课题组研制的新型DTX-LP,与DTX-IN相比,其药代动力学参数和组织分布以及在尿和粪中的排泄都有显著的差异。新型DTX-LP改变了DTX在体内的分布,未改变DTX的代谢,DTX-LP与DTX-IN两种制剂体内外代谢基本一致。给药后,在DTX-LP与DTX-IN两种制剂的兔体内代谢中发现代谢产物9种,其中已知代谢产物4种,即为M-1、M-2、M-3和M-4,新的代谢产物5种,即为Mun-1、Mun-2、Mun-3、Mun-4和Mun-5。DTX-LP在肺部不代谢。综上所述,DTX-LP极大提高了DTX在肺部的浓度,而相应降低了在血液、心、肾等其他器官组织的DTX浓度,延长了DTX从体内的消除过程,有利于DTX更好的发挥药效,同时也降低了DTX的全身毒副作用,而增加了DTX的用药安全性。
[Abstract]:In this paper , the effects of DTX - LP on the pharmacokinetics of lung cancer have been studied by UPLC - MS / MS method . The relative recovery of DTX - LP was higher than that of DTX - IN . Compared with DTX - IN , the results showed that DTX - LP and DTX - IN were significantly lower than DTX - IN . The results showed that DTX - LP and DTX - IN were significantly lower than DTX - IN . In conclusion , DTX - LP greatly improves the DTX concentration in the lungs , and correspondingly reduces the DTX concentration in other organ tissues such as blood , heart , kidney and the like , prolongs the elimination process of DTX from the body , contributes to the better effect of DTX , and also reduces the systemic toxic side effect of DTX , and increases the drug safety of DTX .

【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R965

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