在东方拟无枝酸菌中建立I-SceI内切酶介导的无标记敲除系统

发布时间：2018-03-04 12:51

  本文选题：I-SceI内切酶　切入点：东方拟无枝酸菌　出处：《中国抗生素杂志》2015年05期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的在东方拟无枝酸菌中建立由I-Sce I介导的无标记高效重组系统。方法首先构建可用于东方拟无枝酸菌的I-Sce I操作盒,通过敲除多烯类化合物ECO-0501合成相关基因hem A2,比较操作盒使用前后获得hem A2基因双交换突变株的效率。结果在没有引入I-Sce I的情况下,随机重组的发生几率仅约2%,而导入后,由于I-Sce I酶对引入DNA位点的双链切割,导致双交换重组的发生率提高至90%以上。结论 I-Sce I系统是一种可用于东方拟无枝酸菌无标记遗传操作的有效工具。
[Abstract]:Objective to establish a highly efficient and unlabeled recombinant system mediated by I-Sce I in Dendrolimus orientalis. Methods the I-Sce I operating box was constructed. By knockout the polyene compound ECO-0501 synthesis related gene hem A2, the efficiency of the double exchange mutant of hem A2 gene was compared before and after the operation box was used. Results without the introduction of I-Sce I, the probability of random recombination was only about 2%, but after the introduction, Due to the double strand cleavage of I-Sce I enzyme introducing DNA site, the rate of double exchange recombination increased to more than 90%. Conclusion I-Sce I system is an effective tool for unlabeled genetic manipulation of dendritic bacteria in the East.
【作者单位】： 上海交通大学药学院;上海来益生物药物研究开发中心有限责任公司;
【基金】：国家自然科学基金(No.81202440)
【分类号】：R914.5

【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：1565730