在ox-LDL致内皮细胞损伤中HSP22的保护作用及他汀的干预作用

发布时间：2018-03-09 23:07

  本文选题：HSP22　切入点：HUVECs　出处：《南昌大学》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的： 研究热休克蛋白22（HSP22）在ox-LDL致人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤中的作用及他汀的干预作用，并探讨其机制。 方法： 实验分为三组：正常对照组、空质粒转染对照组（con组）、shRNA质粒转染组（shRNA组）， con组在HUVECs中加入Lipo与空质粒（pGcsi-U6/Neo/GFp/shRNA），shRNA组在HUVECs中加入Lipo及shRNA质粒（pGcsi-U6/Neo/GFp/shRNA/HSP22）。成功转染后，各组分四个亚组：对照组、ox-LDL组、他汀组、他汀+ox-LDL组。采用MTT、Westernblot筛选合适的ox-LDL及阿托伐他汀干预浓度与时间。观察ox-LDL诱导环境下HSP22的表达情况，ELISA检测TNF-α表达情况，Western blot检测eNOS、p38MAPK、erk、p-erk表达情况。 结果： 1、ox-LDL及阿托伐他汀合适的干预时间与浓度： （1）选定160μg/mlox-LDL干预48h时，HSP22表达最高（P0.01），并对内皮细胞有明显抑制作用（P0.05）。 （2）选定40μg/ml阿托伐他汀干预48h时，HSP22表达最低（P0.01），且对内皮细胞有明显促进作用（P0.05）。 2、HSP22蛋白的表达：在相同干预条件下，，shRNA组HSP22蛋白表达明显低于正常对照组与con组（P0.01）。在各大组中，ox-LDL组HSP22表达均明显高于对照组及ox-LDL+他汀组（P0.01）。 3、p38MAPK的表达：在相同干预条件下，shRNA组p38MAPK表达明显高于正常对照组与con组（P0.01）。在各大组中，ox-LDL组p38MAPK表达均高于对照组及ox-LDL+他汀组（P0.01）。 4、erk、p-erk的表达：在相同干预条件下，shRNA组erk、p-erk表达均低于正常对照组与con组（P0.01）。在各大组中，ox-LDL组erk、p-erk表达均高于对照组及ox-LDL+他汀组（P0.01）。 5、TNF-α的表达：在相同干预条件下，shRNA组TNF-α表达显著高于正常对照组与con组（P0.01）。在各大组中，ox-LDL组TNF-α表达均明显高于对照组及ox-LDL+他汀组（P0.01）。 6、eNOS的表达：在相同干预条件下，shRNA组eNOS表达明显低于正常对照组与con组（P0.01）。在各大组中，ox-LDL组eNOS表达均显著低于对照组及ox-LDL+他汀组（P0.01）。 结论： 1、ox-LDL损伤HUVECs可诱导HSP22表达。 2、在ox-LDL诱导环境下HSP22的保护作用可能与下调p38MAPK、上调erk抗凋亡有关，与TNF-α抗炎有关，与eNOS改善内皮功能有关。 3、在ox-LDL诱导环境下他汀的保护作用可能与下调p38MAPK、erk、TNF-α抗炎有关，与eNOS改善内皮功能有关。 4、他汀的保护作用可能与HSP22无关。
[Abstract]:Objective:
To investigate the role of heat shock protein 22 (HSP22) in the injury of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) induced by ox-LDL and the intervention of statins, and to explore its mechanism.
Method锛

本文编号：1590669