抑制E.coli的SOS应答对恩诺沙星抗药性的影响

发布时间：2018-03-25 20:02

  本文选题：E.coli　切入点：SOS应答　出处：《中国科学:生命科学》2015年05期

【摘要】：通过敲除SOS应答启动蛋白基因rec A,探讨SOS应答对E.coli恩诺沙星抗药性的影响,并体外评价Rec A抑制剂和恩诺沙星联用对细菌协同抑制作用的影响.利用Red重组系统,构建E.coli ATCC 25922的rec A缺失菌株E.coli ATCC 25922/?rec A;在恩诺沙星压力下,利用荧光定量PCR测定SOS应答系统相关基因rec A和umu C表达量的变化.用微量肉汤稀释法测定恩诺沙星等常用抗生素对两个菌株的MIC变化;利用梯度平板法测定恩诺沙星对两个菌株抗药性变异的影响;合成Rec A抑制剂,并评估其与恩诺沙星联合抑制E.coli生长及其抗药性的作用.结果表明,E.coli ATCC 25922/?rec A菌株对恩诺沙星的最低抑菌浓度值降低至原始菌株的1/8;经药物处理后,在梯度平板上,rec A缺失菌株较野生型不易产生抗药性;荧光定量PCR表明,rec A缺失菌株或在Rec A抑制剂作用下,SOS应答系统受到一定的抑制.敲除rec A,使菌株对恩诺沙星的抗药性和抗药率均明显降低;Rec A抑制剂在一定程度上能抑制SOS应答,起到协同抑菌作用.
[Abstract]:By knockout the SOS response promoter gene rec A, the effect of SOS response on E.coli enrofloxacin resistance was investigated, and the effect of Rec A inhibitor and enrofloxacin combined with enrofloxacin on bacterial co-inhibition was evaluated in vitro. Red recombinant system was used. To construct E.coli ATCC 25922% of the rec A deletion strain of E.coli ATCC 25922? Under the pressure of enrofloxacin, the expression changes of rec A and umu C genes related to SOS response system were detected by fluorescence quantitative PCR. The MIC changes of enrofloxacin and other commonly used antibiotics to two strains were determined by broth dilution method. The effect of enrofloxacin on the variation of drug resistance of two strains was determined by gradient plate method. Rec A inhibitor was synthesized, and the inhibitory effect of enrofloxacin combined with enrofloxacin on the growth and drug resistance of E.coli was evaluated. The results showed that E.coli ATCC 25922%? The minimum inhibitory concentration of rec A to enrofloxacin decreased to 1 / 8 of the original strain. Fluorescence quantitative PCR showed that the Rec A deficient strain or the Rec A inhibitor inhibited the response system to a certain extent. Knockout of rec A significantly reduced the resistance to enrofloxacin and the resistance rate of the strain to enrofloxacin in a certain process. Can inhibit the SOS response, Play a synergistic bacteriostatic effect.
【作者单位】： 山东大学农学院;山东省农业科学院畜牧兽医研究所;山东省科学院新材料研究所;
【基金】：国家自然科学基金(批准号:81271886) 山东省科技攻关计划(批准号:2012GGC02012) 山东省自然科学基金青年基金(批准号:ZR2013CQ037) 国家科技重大专项(批准号:2013ZX10004217-003) 山东省农业重大应用技术创新课题资助
【分类号】：R96

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：1664641