共载化学药物和CpG ODN的GA-PEI-PLGA纳米给药系统研究
本文选题：GA-PEI-PLGA 切入点：纳米粒 出处：《广东药科大学》2016年硕士论文
【摘要】：近年来,大量研究报道了共载化疗药物和基因药物的阳离子纳米载体,该载药纳米载体能同时达到化疗和基因治疗的目的,相互协同抑制肿瘤的生长。基于此,本文在课题组前期研究的基础上进一步开展共载化学药物和CpG ODN的GA-PEI-PLGA纳米给药系统的研究。在前期的研究中,本课题组已成功利用EDC·HCl以及NHS的催化作用,将肝靶向性分子GA、疏水性PLGA和亲水性PEI通过化学合成方法形成GA修饰的PEI-PLGA共聚物——GA-PEI-PLGA。本文应用TNBS法测定GA-PEI-PLGA中PLGA和GA的取代度分别为(11.48±0.48)%和(19.26±1.89)%。酸碱滴定法结果也表明虽然其质子缓冲能力不如PEI,但GA-PEI-PLGA仍保留较好的质子缓冲能力。本文以大鼠血浆中AST、ALT、TP及CRE的含量为指标,结合组织切片观察,考察了GA-PEI-PLGA和PEI-PLGA纳米粒对肝脏和肾脏的毒性。结果表明,经多次注射后两种纳米粒在一定程度上均会影响肝脏的功能,但与PEI-PLGA纳米粒相比,经GA修饰后的GA-PEI-PLGA纳米粒的肝毒性则大大降低。而PEI-PLGA纳米粒和GA-PEI-PLGA纳米粒均不会影响肾脏的功能。为了进一步研究GA-PEI-PLGA纳米粒共载化学药物和基因药物后的性质,本文选择了羟基喜树碱(HCPT)和CpG ODN作为模型药物。HCPT可选择性地抑制拓扑异构酶I而干扰DNA的复制,从而有效抑制肝癌细胞的生长。CpG ODN作为免疫佐剂可以诱导Th1型免疫反应,激活巨噬细胞、DC细胞和NK细胞等免疫细胞分泌TNF-α、IFN-γ及IL-12等细胞因子杀伤肿瘤细胞,并能够逆转肝癌免疫抑制状态。采用超声乳化-减压溶剂挥发法制备HCPT/GA-PEI-PLGA纳米粒,并以载药量和包封率为考察指标对其制备工艺进行优化。优化后的处方工艺为:药物/载体比3:10、油相/水相体积比1:9、超声功率60%、超声时间15min。制得的载药纳米粒包封率高达(87.52±3.91)%,载药量为(20.10±4.72)%。采用动态透析法考察hcpt/ga-pei-plga纳米粒的体外释药特性,结果表明ga-pei-plga纳米粒可延缓hcpt的释放,药物释放符合higuchi方程。凝胶电泳结果也表明,当cpgodn与ga-pei-plga比例为1:10(w/w)时,cpgodn能充分包载到hcpt/ga-pei-plga纳米粒中。所制得的cpg/hcpt/ga-pei-plga纳米粒呈类球形,粒径大小均一,分布均匀,稳定性好,平均粒径为(145.7±13.5)nm,zeta电位为(23.11±2.29)mv。本文选用人源性bel-7402肝癌细胞、hepg2肝癌细胞和spc-a-1肺腺癌细胞作为细胞模型来验证cpg/hcpt/ga-pei-plga纳米粒能否协同抑制肿瘤细胞的生长。结果表明,hcpt/ga-pei-plga纳米粒和hcpt/pei-plga纳米粒对三种肿瘤细胞的抑制作用均显著强于游离hcpt药物。无论是单载hcpt还是共载hcpt和cpgodn,ga-pei-plga纳米粒组对hepg2细胞和bel-7402细胞的抑制作用显著高于pei-plga纳米粒组,但是载药后的ga-pei-plga纳米粒和pei-plga纳米粒对spc-a-1细胞的抑制作用却没有显著性差异,这表明ga-pei-plga纳米粒具有一定的肝靶向作用。虽然cpgodn对肿瘤细胞没有直接杀伤作用,但是其能够增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,因此,cpg/hcpt/ga-pei-plga纳米粒和cpg/hcpt/pei-plga纳米粒对三种肿瘤细胞的抑制作用显著强于hcpt/ga-pei-plga纳米粒和hcpt/pei-plga纳米粒,也显著强于hcpt和cpgodn游离药物的混合溶液。此外,选择鼠源巨噬细胞raw264.7细胞考察了载药纳米粒的免疫刺激活性。由于hcpt能直接杀伤raw264.7细胞,cpg/hcpt/ga-pei-plga纳米粒刺激raw264.7细胞分泌tnf-α的量不如cpg/ga-pei-plga纳米粒,但cpg/hcpt/ga-pei-plga纳米粒仍能保持较好的免疫刺激活性。hcpt/ga-pei-plga纳米粒在小鼠体内分布实验结果表明,尾静脉注射给药后,hcpt/pei-plga纳米粒组和hcpt注射液组中药物随着血液分布至全身各器官,而hcpt/ga-pei-plga纳米粒组中药物主要积聚在肝脏部位,肝脏的药物浓度始终远远高于血浆、心、脾、肺和肾等器官组织,表明ga-pei-plga纳米粒具有明显的趋肝性,不仅能延长hcpt在肝脏部位的作用时间,同时也能降低HCPT对其他脏器的毒性。GA-PEI-PLGA纳米粒是一种具有广阔应用前景的主动肝靶向纳米给药系统。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R943
【相似文献】
相关期刊论文 前10条
1 王志清;刘卫;徐辉碧;杨祥良;;载三氧化二砷的PEG-PLGA隐性纳米粒的制备及体外研究(英文)[J];Chinese Journal of Chemical Engineering;2007年06期
2 ;Effect of Excipients on Stability and Structure of rhCuZn-SOD Encapsulated in PLGA Microspheres[J];Chemical Research in Chinese Universities;2004年03期
3 郭晓东;;Surface Modification of Biomimetic PLGA-(ASP-PEG) Matrix with RGD-Containing Peptide:a New Non-Viral Vector for Gene Transfer and Tissue Engineering[J];Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science Edition);2006年03期
4 陈剑;樊新;周忠诚;阮建明;;PLGA材料仿生改性的最新进展[J];粉末冶金材料科学与工程;2008年06期
5 ;Preparation and mineralization of PLGA/Gt electrospun fiber mats[J];Chinese Science Bulletin;2009年08期
6 李双燕;;PLGA组织工程支架材料的研究与展望[J];国外丝绸;2009年02期
7 郝杰;郑启新;;Biomineralization of the Surface of PLGA-(ASP-PEG) Modified with the K_(16) and RGD-containing Peptide[J];Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science Edition);2009年05期
8 ;Preparation of Tolterodine Metabolite Loaded Biodegradable PLGA Microspheres[J];Chemical Research in Chinese Universities;2010年01期
9 ;Comparison of BSA Release Behavior from Electrospun PLGA and PLGA/Chitosan Membranes[J];Chemical Research in Chinese Universities;2011年04期
10 Y.H.Wu;N.Li;Y.Cheng;Y.F.Zheng;Y.Han;;In vitro Study on Biodegradable AZ31 Magnesium Alloy Fibers Reinforced PLGA Composite[J];Journal of Materials Science & Technology;2013年06期
相关会议论文 前10条
1 郑强;潘志军;薛德挺;李杭;李建兵;;纳米PLGA/HA复合物和骨髓基质干细胞在软骨修复中的应用[A];2009年浙江省骨科学学术年会论文汇编[C];2009年
2 王汉杰;苏文雅;廖振宇;王生;常津;;PLGA/Liposome核壳纳米粒子的制备[A];天津市生物医学工程学会第30次学术年会暨生物医学工程前沿科学研讨会论文集[C];2010年
3 王光林;吴辉;;联合静电纺丝法和转筒接收法制备PLGA—胶原—丝素纳米神经导管[A];第六届西部骨科论坛暨贵州省骨科年会论文汇编[C];2010年
4 赵洁;全大萍;廖凯荣;伍青;;含不同侧氨基密度的ASP-PEG-PLGA的合成与表征[A];中国生物医学工程学会第六次会员代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2004年
5 黄艳霞;任天斌;张丽红;吕凯歌;蒋欣泉;潘可风;任杰;;PLGA/NHA-RGD复合材料的制备及性能研究[A];2006年上海市医用生物材料研讨会论文汇编[C];2006年
6 ;Synthesis of PLGA Labeled with ~(125)I[A];2006年上海市医用生物材料研讨会论文汇编[C];2006年
7 李艳辉;崔媛;张慧敏;关秀文;;利用等离子体技术在PLGA表面固定胶原的研究[A];2011年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2011年
8 何树;毕龙;刘建;扈刚;孟国林;董鑫;郝赋;赵轶男;;新型PLGA/HMS-HA复合微球载体支架对兔骨髓间充质干细胞生物学行为的影响[A];中华医学会第七次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议论文汇编[C];2013年
9 ;Preparation of PLGA Ultrasound Microbubble Loaded Hematoporphyrin and optimization of formulation[A];中华医学会第十次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2009年
10 李志宏;武继民;汪鹏飞;陈学忠;黄姝杰;关静;张西正;;BMP/PLGA缓释微球的制备与体外释放性能[A];第七届中国功能材料及其应用学术会议论文集（第4分册）[C];2010年
相关重要报纸文章 前3条
1 记者 白毅;合成温敏型PLGA-PEG-PLGA嵌段共聚物[N];中国医药报;2006年
2 尹东锋 钟延强;聚合物 药物 制备工艺 附加剂[N];中国医药报;2006年
3 李博;“人造红细胞”[N];大众卫生报;2009年
相关博士学位论文 前10条
1 李玉华;载阿伦磷酸钠PLGA微球的磷酸钙骨水泥复合组织工程骨修复兔股骨髁骨缺损的实验研究[D];山东大学;2015年
2 周璇;RGD靶向微泡与载药微球在肝脏创伤渗血诊断和治疗中的研究[D];中国人民解放军医学院;2015年
3 陶春;可注射镶嵌载生长因子壳聚糖微球的PLGA多孔复合微球支架的研究[D];第二军医大学;2015年
4 封水彬;生物降解型缓释微球的制备、性能及其应用研究[D];华中科技大学;2015年
5 鲍文;靶向纳米载药系统DNR-PLGA-PLL-PEG-Tf治疗恶性血液病的体内、体外研究[D];东南大学;2015年
6 王晨晖;装载蛋白药物的PCADK/PLGA混合微球研究及在重组人生长激素中的应用[D];吉林大学;2016年
7 卢明子;载血红蛋白PEG-PLGA纳米粒子的构建、生物学作用及其靶向性能的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2016年
8 张皓轩;载辛伐他汀PLGA微球/磷酸钙组织工程骨的生物相容性和成骨活性的研究[D];山东大学;2016年
9 李青;新型高效靶向ROS响应的载药纳米粒子系统在口腔鳞癌治疗中的研究[D];山东大学;2016年
10 齐峰;粒径均一的PLGA颗粒制备及在长效缓释体系和Pickering乳液中的应用[D];中国科学院研究生院(过程工程研究所);2015年
相关硕士学位论文 前10条
1 阳刚;复合肌腱修复材料—载细胞用防粘连性隔离/支架型PLGA膜的体外研制[D];中南大学;2010年
2 唐冠男;微流控技术原位合成多形貌PLGA/TiO_2复粒子及其体外药物释放的研究[D];华南理工大学;2015年
3 李文秀;形貌可控的PLGA/PCL复合粒子的制备及体外降解性能的基础研究[D];华南理工大学;2015年
4 黄卓颖;重组人表皮生长因子PLGA纳米粒经皮治疗大鼠糖尿病溃疡的作用研究[D];福建中医药大学;2015年
5 闻继杰;含胺基修饰beta-环糊精的可降解两亲性聚酯的合成及其对蛋白质和抗癌药物的控制释放[D];天津理工大学;2015年
6 王翠伟;基于点击化学制备PCL/PEG两亲性共网络聚合物以及不同支臂PLGA作为疫苗载体的初步研究[D];北京协和医学院;2015年
7 王共喜;PLA/AT纳米复合材料的制备与性能及PLGA纤维的表面改性[D];复旦大学;2014年
8 刘青;植入体材料与PLGA载药微球的复合研究[D];西南交通大学;2015年
9 张科技;蚕丝-PLGA支架的生物相容性及力学性能的研究[D];浙江省医学科学院;2015年
10 黄晓君;关节腔注射用青藤碱-PLGA微球—温敏凝胶的制备及评价[D];广东药学院;2015年
，本文编号：1676444
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/yiyaoxuelunwen/1676444.html
