α-芋螺毒素Lt1.1的克

发布时间：2018-04-02 10:54

  本文选题：α-芋螺毒素　切入点：Lt.　出处：《军事医学》2017年05期

【摘要】：目的发现作用于神经元烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)的拮抗剂,为研制新型镇痛药和神经生物学工具奠定基础。方法根据芋螺毒素A超家族DNA中保守的内含子及3'端非转录区(3'UTR)设计引物,从中国南海信号芋螺(Conus litteratus)中克隆获得新芋螺毒素Lt1.1序列。固相法合成Rink树脂肽,经裂解、空气氧化折叠、纯化后获得目的肽,利用两步氧化折叠法鉴定其二硫键连接方式。将神经元nAChR各亚基的cRNA在爪蟾卵母细胞中表达,利用双电极电压钳检测通道电流。结果获得一种新α-芋螺毒素Lt1.1序列(GCCSHPACNVNNPDICNH2),其二硫键连接方式为"C1-C3、C2-C4",作用靶点为nAChR α3β2和α3β4亚型,IC50分别为166.76和190.00nmol/L。结论 Lt1.1是一种典型的4/7型α-芋螺毒素,其选择性抑制了nAChR α3β2和α3β4亚型。
[Abstract]:Objective to find an antagonist acting on neuronal nicotinic acetylcholine receptor (nAChR). Methods Primer was designed based on conserved intron and 3'terminal non-transcriptional region of conotoxin A superfamily DNA. The new conotoxin Lt1.1 sequence was cloned from Conus litteratus. the Rink resin peptide was synthesized by solid phase method. The disulfide bond connection was identified by two-step oxidative folding method. The cRNA of the neuron nAChR subunits was expressed in Xenopus oocytes. Results A new 伪 -Conotoxin Lt1.1 sequence, GCCSHPACNVNNPDICNH _ 2, was obtained. Its disulfide bonding mode was "C _ 1-C _ 3H _ 2-C _ 4" and the IC50 of nAChR 伪 _ 3 尾 _ 2 and 伪 _ 3 尾 _ 4 subtype were 166.76 and 190.00nmol / L, respectively. Conclusion Lt1.1 is a typical 47 伪 -conotoxin. It selectively inhibited the subtypes of nAChR 伪 3 尾 2 and 伪 3 尾 4.
【作者单位】： 军事医学科学院生物工程研究所;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81473192) 国家973计划资助项目(2010CB529802)
【分类号】：R91

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本文编号：1700063