穿膜肽凋亡素融合蛋白诱导黑色素瘤细胞凋亡的实验研究

发布时间：2018-04-09 04:03

  本文选题：细胞穿膜肽　切入点：蛋白转导　出处：《中国药学杂志》2017年02期

【摘要】：目的探讨新型细胞穿膜肽h PP10和凋亡素Apoptin融合蛋白介导小鼠黑色素瘤细胞B16凋亡的效应。方法构建p ET15b-h PP10-Apoptin、p ET15b-Apoptin原核表达质粒,经IPTG诱导和NI-NTA树脂纯化后得到融合蛋白;运用TUNEL法体外检测h PP10-Apoptin诱导B16细胞的凋亡效应;制备荷瘤小鼠模型,并在体内检测h PP10-Apoptin融合蛋白的抗肿瘤能力。结果融合蛋白h PP10-Apoptin经Western blot鉴定正确,且此融合蛋白能在体内外有效诱导B16黑色素瘤细胞凋亡。结论新型细胞穿膜肽h PP10可有效携带Apoptin穿透细胞膜并发挥抗肿瘤作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of a novel transmembrane peptide h PP10 and apoptin Apoptin fusion protein on the apoptosis of murine melanoma cell line B16.Methods the prokaryotic expression plasmid of p ET15b-h PP10-Apoptinine p ET15b-Apoptin was constructed, and the fusion protein was obtained by IPTG induction and NI-NTA resin purification. The apoptosis of B16 cells induced by h PP10-Apoptin was detected by TUNEL assay in vitro.The anti tumor ability of h PP10-Apoptin fusion protein was detected in vivo.Results the fusion protein h PP10-Apoptin was proved to be correct by Western blot, and this fusion protein could effectively induce apoptosis of B16 melanoma cells in vitro and in vivo.Conclusion h PP10, a novel cell membrane penetrating peptide, can effectively carry Apoptin through the cell membrane and play an anti-tumor effect.
【作者单位】： 三峡大学肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室;三峡大学医学院病原生物与免疫学系;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81501330) 湖北省科技计划自然科学基金资助项目(2010CDB10705) 三峡大学人才启动基金资助项目(KJ2014B066)
【分类号】：R96

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本文编号：1724741