二氧化氯喷雾剂的制备与评价及其止血机理研究

发布时间：2018-04-09 05:19

  本文选题：二氧化氯　切入点：喷雾剂　出处：《山西医科大学》2014年硕士论文

【摘要】：目的：本文以自制稳定性二氧化氯溶液为主药，采用适宜的高分子材料为载体，将其制备成二元喷雾剂，以克服二氧化氯使用上的不稳定性。并且对所述制剂进行质量评价、抗菌活性筛选，对受试动物进行皮肤刺激性实验与安全性评价，初步进行止血机理探索。 方法：采用碘量法对自制稳定性二氧化氯溶液进行含量测定。采用反相高效液相离子对色谱法建立自制二氧化氯喷雾剂的含量测定方法。以释放度作为评定指标，采用紫外分光光度法建立含量测定方法，分别对喷雾剂处方组分的海藻酸钠、甘油用量等进行筛选，采用正交试验确定了处方组成。然后根据2010版药典对喷雾剂的性状、pH值、离心试验等的规定进行了质量评价。以家兔皮肤为研究对象，进行皮肤刺激性试验，对二氧化氯喷雾剂进行安全性评价。选择金黄色葡萄球菌，大肠杆菌和白色念球菌为试验菌种对二氧化氯喷雾剂抗菌性进行了试验。并且以家兔为受试动物，通过半自动血凝仪对家兔血浆测定了凝血酶时间（TT）、凝血酶原时间（PT）、激活的部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原含量（FIB）。以大鼠为受试动物，利用血小板聚集率仪，在二磷酸腺苷（ADP）、花生四烯酸(AA)、血小板活化因子(PAF)等诱导剂作用下，测定大鼠血小板聚集率；初步探索了二氧化氯的止血机理。 结果：碘量法测定的三批自制稳定性二氧化氯溶液的浓度分别为21.96mg/mL、23.77mg/mL、20.60mg/mL，测定结果的RSD值分别为1.4%、0.0%、1.7%。采用反相高效液相离子对色谱法，对二氧化氯喷雾剂进行含量测定，平均加样回收率为98.6%，测定结果的RSD值为2.4%，表明这种方法准确可靠；采用紫外分光光度法对稳定性二氧化氯溶液进行含量测定，平均加样回收率为97.9%，RSD值为1.7%；通过正交试验最终确定二氧化氯喷雾剂的配方组成为：海藻酸钠0.25g、甘油1.0g、聚丙烯酸200μL、无水乙醇4.0mL、稳定性二氧化氯溶液24.72mg；该自制喷雾剂为无色透明的溶液，pH值在4.6左右，离心后无分层现象。稳定性试验表明该制剂应该在避光，20℃左右保存；通过家兔完整皮肤和破损皮肤的单次和多次刺激试验，家兔皮肤未出现任何红肿和斑块焦痂，其安全性可靠；选择金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌进行最小抑菌和最小杀菌试验，得出该制剂相对应于以上三种菌的最小抑菌浓度分别为18.6、18.6、37.1μg/mL，最小杀菌浓度分别为148.6、148.6、1188μg/mL。与云南白药（阳性对照组）比较，二氧化氯在0.05mg/mL-0.20mg/mL范围内，凝血酶时间（TT）变化百分率值优于阳性对照组结果，，二氧化氯在0.08mg/mL-0.15mg/mL范围内，部分激活的凝血酶时间（APTT）平均值优于阳性对照组结果，随着二氧化氯浓度增加，凝血酶原时间（PT）平均值呈不规律性变化，而纤维蛋白原含量（FIB）随着二氧化氯浓度增加凝血时间与空白相比均减小，但趋势为先减小后增加；其中试验组与阳性对照组含药量相同，但凝血酶时间（TT）平均值变化百分率结果显示，二氧化氯略优于云南白药凝血时间；其中试验组结果部分激活的凝血酶时间（APTT）明显优于云南白药组，其中凝血酶原时间（PT）的试验结果则略微高于阳性对照组，而纤维蛋白原含量（FIB）的对应结果接近于云南白药组；通过血小板聚集率试验，云南白药组的聚集率为40%-50%，而二磷酸腺苷（ADP）诱导的二氧化氯溶液试验组的最大聚集率也为40%-50%，花生四烯酸（AA）和血小板活化因子(PAF)诱导的二氧化氯试验组最大聚集率在20%-30%，生理盐水的最大聚集率为0。 结论：本文制备了一种具有快速止血、可用于皮肤外用的二氧化氯两元喷雾剂。并且其制剂的质量标准均符合2010版药典的规定。试验结果表明，该制剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌有杀灭作用，且对完整皮肤和破损皮肤均无刺激性，可用于皮肤的局部快速止血。通过四项凝血指标测定，可初步表明，部分活化凝血酶原时间（APTT）平均值递减趋势，可初步推断二氧化氯可能是一种凝血酶激活剂，促进对凝血因子Ⅺ和因子Ⅻ的激活，加快启动内源性凝血途径，从而起到快速凝血的作用，且不会伴随有血栓的形成。通过凝血酶原时间（PT）平均值呈不规律性变化，可初步推断二氧化氯几乎不诱发或促进外源性凝血途径。通过凝血酶时间（TT）平均值总体递减趋势，可初步推断二氧化氯在0.01mg/mL-0.20mg/mL范围内，具有促进血浆纤维蛋白原转变成纤维蛋白能力的作用，使纤维蛋白原更快的转变成纤维蛋白，从而在单位时间内形成更多的纤维蛋白，达到快速止血的作用。 血小板在不同诱导剂的作用下发生不同的活化反应。体外实验结果表明二氧化氯均在ADP、PAF和AA诱导下引起大鼠离体血小板不同程度聚集，且随二氧化氯浓度增加呈先扬后抑之规律，数据同样说明二氧化氯具有快速止血作用，但不会伴随有血栓形成的潜在因素。在ADP、PAF和AA三种诱导剂中，二氧化氯表现出对ADP诱导的大鼠血小板聚集具有更强的诱导作用。二氧化氯对ADP、PAF和AA三种途径均有诱导作用，可能通过一共同环节诱导血小板活化。目前公认，血小板活化有ADP、AA和PAF三条途径，但最终通过降低血小板内cAMP水平并增加细胞内游离钙离子浓度而引起血小板活化聚集。为二氧化氯成为止血候选药物提供理论依据。
[Abstract]:Objective : To prepare a binary spray by using a self - made stable chlorine dioxide solution as the main drug , to prepare a binary spray to overcome the instability of chlorine dioxide use .

Methods : The content of self - made chlorine dioxide spray was determined by iodometric method . The determination method of chlorine dioxide spray was established by RP - HPLC .
The hemostatic mechanism of chlorine dioxide was preliminarily explored .

RESULTS : The concentrations of the three batches of self - made stable chlorine dioxide solution determined by iodometric method were 21.96 mg / mL , 23.77 mg / mL and 20.60 mg / mL , respectively . The RSD values were 1.4 % , 0.0 % and 1.7 % , respectively .
The content of stable chlorine dioxide solution was determined by ultraviolet spectrophotometry . The average recovery rate was 97.9 % and RSD was 1.7 % .
The composition of chlorine dioxide spray was determined by orthogonal test : 0.25 g of sodium alginate , 1.0 g of glycerol , 200 渭L of polyacrylic acid , 4.0 mL of absolute ethyl alcohol and 24.72 mg of stable chlorine dioxide solution .
The self - made spraying agent is a colorless and transparent solution , the pH value is about 4.6 , and there is no delamination phenomenon after centrifugation . The stability test shows that the preparation should be stored at the temperature of 20 鈩

本文编号：1725026