基于微透析、高效液相色谱及微顺序注射检测大鼠、小鼠血液中的氧氟沙星

发布时间：2018-04-17 18:48

  本文选题：氧氟沙星 + 微透析　； 参考：《新疆师范大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:氧氟沙星作为喹诺酮类药物,具有广谱抗菌的特点,对多数细菌都具有较强的抗菌活性,临床用药较为广泛。该药为手性药物,但目前的报道均以消旋体对其进行评估,而未对该药进入体内的两种对映异构体进行探讨和研究,使得评估过低或过高,对合理用药及人体健康带来安全隐患。因此,对该药的研究已经成为化学及医药学领域的研究热点与关注焦点。本研究旨在探索建立检测氧氟沙星外消旋体、两种对映异构体的高效液相色谱法及基于荷移反应结合微透析-微顺序注射检测氧氟沙星含量的方法,为氧氟沙星在临床上合理使用提供理论依据,为实现氧氟沙星的在线检测提供技术支持。方法:采用微透析取样技术,结合高效液相色谱法检测大鼠血液中氧氟沙星含量;以硫酸铜/D-苯丙氨酸溶液为手性流动相添加剂,建立高效液相色谱法,检测给药氧氟沙星后的小鼠血液及各组织中两种对映异构体的含量及分布;基于氧氟沙星与氯冉酸发生荷移反应,结合微透析-微顺序注射-阀上实验室检测大鼠血液中氧氟沙星的含量。结果:(1)建立了反相高效液相色谱法测定大鼠血液中氧氟沙星含量的方法,在0.025μg/m L~3.200μg/m L浓度范围内,氧氟沙星含量与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9996),日内精密度实验RSD分别为1.10%、0.60%和0.39%(高、中、低浓度),日间精密度RSD分别为1.31%、0.97%和0.49%,检出限为0.025μg/m L,并优化测定探针体外回收率的条件,最终确定灌流流速为1μL/min,温度为37℃,且在9h内探针稳定性良好;(2)建立了测定小鼠血液及各组织中氧氟沙星两种对映异构体含量的手性高效液相色谱法,在0.1~12.8μg/m L浓度范围内,左氧氟沙星与右氧氟沙星的浓度与峰面积的线性关系良好,相关系数分别为r=0.9995和r=0.9997,精密度实验结果显示RSD值均小于15%,左氧氟沙星与右氧氟沙星平均提取回收率值在85.16%~94.12%(高、中、低浓度),且小鼠空白血浆及空白试剂在其出峰位置无干扰;(3)利用荷移反应可增强荧光强度的原理,结合微透析-微顺序注射-阀上实验室技术建立了氧氟沙星含量的检测方法,结合微顺序注射-阀上实验室系统中多功能流通池模块,氧氟沙星溶液用量50μL,氯冉酸溶液的最佳浓度20μg/mL、用量50μL,检测流速20μL/s,延迟时间0s,在5μg/mL~30μg/m L浓度范围内,氧氟沙星的浓度与荧光强度呈现良好的线性关系(r=0.9994),精密度实验RSD介于2.62%~4.73%之间;检出限为2μg/m L。结论:本研究建立了三种检测生物样品中氧氟沙星含量的方法,方法专属性好,符合生物样品分析方法要求,为氧氟沙星的临床用药与在线检测提供了参考依据、奠定了实践基础。
[Abstract]:The aim of this study was to establish a HPLC method for the determination of ofloxacin in blood of rats . The average recovery rate of ofloxacin and levofloxacin was 85.16 % 锝，

本文编号：1764826