鸡冠中透明质酸的制备及其功能性评价

发布时间：2018-04-29 04:21

  本文选题：鸡冠 + 透明质酸　； 参考：《哈尔滨商业大学》2014年硕士论文

【摘要】：对以鸡冠为原料提取的透明质酸进行纯化以及降解,并对其抗氧化效果进行研究。 以得率为标准检验透明质酸,通过对比双酶法和试剂法两种方法的提取效果,并采用响应曲面法优化提取条件,确定双酶法提取的最佳工艺条件为：酶用量0.004g,酶解温度46℃,酶解时间2.3h,该工艺制备透明质酸得率为10.36%,对乙醇浸泡法提取鸡冠中透明质酸的料液比、乙醇浓度和静置时间等因素进行优化组合,确定乙醇浸泡法提取透明质酸的最佳工艺条件为：料液比1：177(g/mL)、乙醇浓度90%、静置时间25.7h,鸡冠中透明质酸的得率为27.37%。 以纯度为检验指标,对阴离子树脂法和溶剂沉淀法纯化鸡冠中透明质酸的方法进行比较。对阴离子交换树脂进行静态吸附及解析实验,确定选用201×7阴离子交换树脂,得到透明质酸最优纯化条件为：吸附液与树脂体积比为4：1(g/mL)；树脂吸附时间为45min洗脱剂浓度为0.6mol/L的氯化钠溶液；洗脱剂流速为1.0mL/min;洗脱剂与树脂的体积比为4：1(g/mL)。溶剂沉淀法纯化透明质酸,选择十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)为最佳溶剂,通过单因素及响应曲面试验确定最佳工艺条件为：CTAB浓度为11.90%,pH值为9.0,HA粗提液与CTAB溶液料液体积比为1：3.70(g/mL)。对离子交换法和溶剂沉淀法分别采用双光束紫外分光光度法测定纯化后透明质酸的含量,纯度分别为40.05%和82.29%。以此确定最佳纯化方法为溶剂沉淀法,提取物中透明质酸的纯度明显得到提高。 对提取后的物质进行检测,证明提取的物质为透明质酸；对纯化后的物质进行紫外光谱(UV)检测及高效液相色谱(HPLC)检测,对比得出纯化以后的样品与标品出峰位置一致。对纯化后的样品进行红外光谱检测,得到纯化后物质和标品透明质酸的结构一致。进一步证明从鸡冠中提取的物质为透明质酸。 应用还原糖法测定降解后透明质酸的分子量,通过单因素试验、响应曲面法分析建立二次回归模型,对降解时间、自由基的添加量,降解pH,降解温度和料液比的影响因素进行优化组合,确定降解鸡冠中透明质酸的最佳工艺条件为：降解时间5min、H202浓度为1.67mol/L.料液比(Vc:H2O2)为1：4.13(g/mL),pH为8.0,温度为25℃时降解程度最好。该工艺降解透明质酸得分子量最低为1791。 对鸡冠中透明质酸的抗氧化活性进行研究,实验结果表明：透明质酸对五种自由基表现出了良好的清除能力。对总抗氧化能力、超氧阴离子、羟自由基、烷基自由基、脂质体的最大抑制率分别为18.97U/mL、42.87%、50.69%、41.22%、50.69%。
[Abstract]:The hyaluronic acid extracted from chicken crowns was purified and degraded, and its antioxidant effect was studied. The extraction efficiency of hyaluronic acid was tested by using yield as standard. By comparing the extraction effects of two methods, and using the response surface method to optimize the extraction conditions, the optimum conditions were determined as follows: enzyme dosage 0.004 g, enzymatic hydrolysis temperature 46 鈩，

本文编号：1818366