rhCNB抗肿瘤药效学评价及相关机制初步研究

发布时间：2018-05-27 14:34

本文选题：rhCNB + 生物技术药物　；参考：《安徽医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：在正常机体的免疫系统监控及调节下,肿瘤细胞必须具备克服机体免疫监控的能力才能存活。当肿瘤细胞发生了免疫逃逸时就将不受控制迅速增长并形成肿瘤内环境,成为肿瘤侵袭、转移等过程发生而不被监视的避风港。机体的免疫力下降降低了对肿瘤细胞的监控,加剧了肿瘤细胞的生长。因此,在肿瘤的发生过程中加强机体的免疫调节已成为癌症防治的重要策略。重组人钙调蛋白磷酸酶B亚基作为基因工程的创新药物,能通过调节免疫功能达到抗肿瘤作用。因此,我们通过建立不同的抗肿瘤药效学模型来评价基因工程抗肿瘤新药rhCNB机体免疫调节及抗癌作用的效果。本研究初步探讨了rhCNB体外抗肿瘤机制。在MTT实验中发现rhCNB高浓度暴露时对肿瘤的生长有一定的抑制作用,而在较低剂量时对肿瘤的生长作用影响较小。本实验室建立细胞共培养模型,将携带Luc的目的基因的肿瘤细胞与巨噬细胞系进行细胞共培养发现,在巨噬细胞与肿瘤细胞的比例(效靶比)为20:1时效果最佳。以此为基础,在20:1的效靶比中加入不同浓度的受试药rhCNB,相比单独给药时,达到相同的抑制率时所用的药物浓度有所下降。同时,运用ELISA检测细胞共培养上清中TNF-α的含量较单独作用时有所增加。对小鼠巨噬细胞Q-PCR检测中,rhCNB能有效上调部分趋化因子和炎性因子,使巨噬细胞向M1的转变激发机体的天然免疫应答过程,参与机体的细胞与体液免疫调节。所以对于rhCNB抗肿瘤的机制,我们初步认为是通过调节天然免疫系统发挥抗肿瘤作用的。在体内动物水平上,通过Cy7标记药物进行活体荧光成像观察rhCNB在动物体内的分布代谢发现,rhCNB以肝脏分布为主,有部分在脾脏中,且rhCNB随时间逐渐代谢。同时采用建立皮下残瘤、原位移植瘤等动物模型进行rhCNB抗肿瘤药效学的评价。实验结果说明rhCNB能够有效抑制S180肉瘤、人肝癌HepG2原位实体瘤的生长。受试药进行隔天给药,且在实验过程中受试药的不同剂量组的动物均未出现死亡显现。在KM小鼠荷S180肉瘤残瘤模型的实验中,rhCNB的高、中、低(40mg/kg、20mg/kg、10mg/kg)组的瘤重抑制率在58.9%~75.3%范围。在人肝癌HepG2原位移植瘤中的瘤重抑制率范围为:38.0%~75.0%。实验结果显示,rhCNB对肿瘤的生长具有抑制作用。综上所述,受试药rhCNB毒性小,安全性好,能通过刺激机体免疫细胞功能杀伤肿瘤细胞,提高受试药在荷瘤小鼠模型中的抑瘤生长的抑制效应。对于rhCNB抗肿瘤药效学的评价和机制的初步探索的研究,不仅为rhCNB作为一类抗肿瘤创新新药的申报奠定了基础,同时也为类似药物的研发提供可靠的药效学评价动物模型方法。
[Abstract]:In this study , it was found that rhCNB could inhibit the growth of tumor cells by regulating the immune function of tumor cells . The results showed that rhCNB could effectively inhibit the growth of tumor cells .
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R96

【参考文献】