少棘蜈蚣钾通道毒素多肽KTX-Ssm175的表达、纯化与鉴定

发布时间：2018-06-09 20:17

  本文选题：少棘蜈蚣 + 转录组　； 参考：《中南民族大学学报(自然科学版)》2016年04期

【摘要】：采用Illumina II代转录组测序技术构建了湖北少棘蜈蚣毒腺转录组数据库,从中筛选到一个全新的毒素多肽编码基因KTX-Ssm175.经序列比对显示KTX-Ssm175多肽与κ-SLPTX-Ssm1a高度同源,提示KTX-Ssm175多肽为一种新的电压门控性钾通道阻断剂.采用基因工程技术构建了p GEX-4T-1-KTX-Ssm175原核表达载体,通过GST融合蛋白表达法对KTX-Ssm175多肽在大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达和分离纯化.MALDI-TOF-MS质谱测定显示纯化的KTX-Ssm175多肽分子量与理论值相吻合,说明成功实现了KTX-Ssm175多肽的基因工程制备,为深入研究其结构与功能提供了物质基础.
[Abstract]:A novel toxin peptide encoding gene KTX-Ssm175was constructed by Illumina II generation transcriptome sequencing technique. Sequence alignment showed that KTX-Ssm175 polypeptide was highly homologous to 魏 -SLPTX-Ssm1a, suggesting that KTX-Ssm175 peptide is a new voltage-gated potassium channel blocker. The prokaryotic expression vector of pGEX-4T-1-KTX-Ssm175 was constructed by genetic engineering technique. KTX-Ssm175 polypeptide was induced and expressed in Rosetta by GST fusion protein expression method. The molecular weight of purified KTX-Ssm175 polypeptide was consistent with the theoretical value by MALDI-TOF-MS mass spectrometry. The results show that the genetic engineering of KTX-Ssm175 polypeptide has been successfully realized, which provides a material basis for further study of its structure and function.
【作者单位】： 中南民族大学药学院;中南民族大学生物医学工程学院;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81373379) 湖北省自然科学基金资助项目(2015CFB491) 国家级大学生创新训练项目(GCX15009)
【分类号】：R99

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本文编号：2000703