抗VEGF抗体Fab片段在大肠埃希菌中的可溶性表达策略

发布时间：2018-09-14 15:19

【摘要】：抗血管内皮细胞生长因子(VEGF)抗体Fab片段能够抑制VEGF的促血管生成作用,在糖尿病性黄斑水肿等眼科疾病的治疗中有重要的应用价值。在基因工程中大肠埃希菌(Escherichia coli)是Fab片段蛋白的主要表达系统,然而Fab片段往往会在大肠埃希菌内形成不可溶的包涵体,而不具有生物活性。本研究从引入分子伴侣、重组蛋白诱导表达的温度、时间等方面入手,进行系统优化,使绝大部分Fab蛋白可以分泌到大肠埃希菌周质中,大大提高了抗VEGF抗体Fab片段的可溶性表达效率和生物学活性,为其工业生产奠定基础,同时也为其他种类重组Fab分子的可溶性表达提供借鉴。
[Abstract]:The anti-vascular endothelial growth factor (VEGF) antibody Fab fragment can inhibit the angiogenesis of VEGF and has important application value in the treatment of diabetic macular edema and other ophthalmic diseases. In genetic engineering, Escherichia coli (Escherichia coli) is the main expression system of Fab fragment protein. However, Fab fragment often forms insoluble inclusion bodies in Escherichia coli and has no biological activity. In this study, the molecular chaperones, the temperature and time of expression induced by recombinant proteins were introduced to optimize the expression system, so that most of the Fab proteins could be secreted into the periplasmic tissues of Escherichia coli. The soluble expression efficiency and biological activity of Fab fragment of anti VEGF antibody were greatly improved, which laid a foundation for its industrial production and provided reference for the soluble expression of other kinds of recombinant Fab molecules.
【作者单位】： 上海交通大学药学院细胞工程及抗体药物教育部工程研究中心;
【分类号】：R915

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 汤杨;袁林娜;;药品中大肠埃希菌可疑菌的鉴定[J];药物分析杂志;2008年10期

2 陈国敏;王东辰;李晓霞;申宝鸣;王化芬;;大肠埃希菌的分布及耐药性分析[J];中华医院感染学杂志;2014年10期

3 靳晓红;闫祥华;苏静静;刘伟;刘大星;刘元东;;磷霉素与4种抗菌药物联用对大肠埃希菌的体外抗菌试验[J];实用预防医学;2006年03期

4 承晓京;奚彩萍;叶波;;头孢噻肟与阿奇霉素对大肠埃希菌的联合药敏研究[J];中国当代医药;2009年05期

5 杨力伟;方芳;刘晓娜;孟小林;;羊大肠埃希菌灭活苗微囊化制剂的研究[J];江苏农业科学;2014年01期

6 张迎春,张建法,郭亚丽;大肠埃希菌灌肠治疗肠道菌群失调30例[J];中国乡村医药;2003年05期

7 陆蕾;王宏;李亚红;蔡伟民;;Tk吨化合物对大肠埃希菌和金葡菌的光敏抗菌活性研究[J];中国抗生素杂志;2005年11期

8 赵宗珉;褚云卓;万建华;白玉兰;张静萍;李静波;王欣;王倩;李丽云;陈佰义;;哌拉西林-他唑巴坦替换第三代头孢菌素对肠道产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌定植的影响[J];中华内科杂志;2007年09期

9 赵旺胜，周小玉，，陈燕秋，童明庆;550株大肠埃希菌对喹诺酮类药物的耐药性分析[J];临床检验杂志;1996年02期

10 鲁晟,王萍,车惠琴;16种抗菌药物对大肠埃希菌敏感实验结果分析[J];中国现代应用药学;2000年06期

相关会议论文 前5条

1 毛理纳;罗予;靳鹏伟;陈妍;;左氧氟沙星体外诱导大肠埃希菌耐药研究[A];中国药理学会化疗药理专业委员会第九届学术研讨会论文摘要集[C];2008年

2 刘立涛;万莉红;卢贞;周黎明;;Ⅰ类整合子介导的大肠埃希菌耐药机制的初步研究[A];中国药理学会第十一届全国化疗药理学术研讨会论文集[C];2012年

3 韩珍;李向阳;杨锦红;李方去;方晔;;亚抑菌浓度头孢西丁体外诱导大肠埃希菌耐药转移[A];2007年浙江省医学检验学学术年会论文汇编[C];2007年

4 王琪;马池;吕媛;杨金辉;郑波;;盐酸安妥沙星对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌持续效应研究[A];第十二届全国抗生素学术会议论文集[C];2013年

5 马池;王琪;吕媛;杨金辉;郑波;;盐酸安妥沙星对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌持续效应研究[A];第8届全国抗菌药物临床药理学术会议暨北京大学临床药理研究所成立三十周年论文集[C];2010年

相关博士学位论文 前1条

1 吴

本文编号：2243089