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桔梗多糖软模板法制备纳米硒及其活性研究

发布时间:2018-11-11 15:03
【摘要】:目的以桔梗多糖为模板,利用Vc还原亚硒酸钠的反应制备粒径适宜的纳米硒-桔梗多糖复合物,在确定其粒径的大小、含硒量和急性毒性的基础上,考察其体外抗氧化性、体内降糖和保肝活性。方法纳米硒-桔梗多糖复合物的制备:采用单因素的实验方法,在固定反应体系中Na2SeO3浓度的条件下,考察桔梗多糖的浓度、Vc和Na2SeO3的配比、反应温度和反应时间等因素对纳米硒形成的影响,以纳米硒尺寸的大小和均匀程度来评价纳米硒的制备条件,从而给出最佳的制备方案;采用胶体溶液的双波长比色法、透射电镜和X射线衍射等手段对制备的纳米硒-桔梗多糖复合物进行表征。用DAN法测定纳米硒中的硒含量。以Vc,桔梗多糖作对照,采用邻苯三酚自氧化法测定超氧阴离子自由基清除率,水杨酸法测定羟基自由基清除率,紫外可见分光光度法测定DPPH自由基的清除能力和还原能力。在降糖活性的研究中,取昆明种小鼠56只分成2组,第一组8只为正常组,第二组48只为模型组。第二组一次性腹腔注射四氧嘧啶溶液进行造模,选择血糖值11.1 mmol·L-1的小鼠为造模成功的小鼠。将造模成功的小鼠分为模型组、阳性组、桔梗多糖组、纳米硒低、中和高剂量组。连续灌胃给药14 d,末次给药16 h后称重,测小鼠血糖值,摘眼球取血测定血清中谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)的含量。保肝作用的实验研究中,取昆明种小鼠56只平均分成7组,分别为正常组、模型组、阳性组、桔梗多糖组、纳米硒低、中和高剂量组,每组8只。正常饲养一周后,连续灌胃给药14 d,第7 d和第14 d给药1 h后,除正常组外,各组小鼠腹腔注射CCl4橄榄油溶液,末次给药16 h后称重。摘眼球采血,测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)和总蛋白(TP)的含量;取肝脏,称重,同时测定肝组织匀浆中的还原型谷胱甘肽(GSH)和MDA的含量。对相同部位的肝脏进行组织形态学观察。结果制备颗粒均匀稳定的纳米硒-桔梗多糖复合物的最佳工艺为:桔梗多糖的浓度为100 mg·L-1、Vc与亚硒酸钠的摩尔比为3:1、反应时间为4 h、反应温度为40℃。其粒径大小约50 nm,且为晶型粉末,在常温下放置1个月,溶液仍为橙色,且无沉淀产生。含硒量为4.018%,急毒实验结果未测出LD50。抗氧化性实验结果表明:纳米硒-桔梗多糖、桔梗多糖清除超氧阴离子自由基的IC50分别为1.72 mg·mL-1和54.44 mg·mL-1;清除羟基自由基的IC50分别为3.19 mg·mL-1和8.27 mg·mL-1;清除DPPH自由基的IC50分别为6.76 mg·mL-1和26.51 mg·mL-1,纳米硒还原能力强于桔梗多糖。其降糖活性实验结果为:纳米硒高、中剂量组与模型组相比可极显著地降低血糖值(p0.01)以及血清中的MDA(p0.01)含量,极显著的提高血清中GSH-Px(p0.01)活性,与对照组相比无显著差异;桔梗多糖组这些指标没有显著地改善。保肝活性实验结果为:纳米硒高、中剂量组与模型组相比可极显著地降低血清中的ALP、ALT、GLB和AST酶活性(p0.01)以及肝组织中的MDA和GSH(p0.01)含量,极显著升高血清中TP、ALB水平(p0.01),与对照组相比无显著差异;纳米硒低剂量组可显著改善这些指标。桔梗多糖组这些指标没有显著地改善。中、高剂量治疗组均可不同程度地改善CCl4所致的病理组织损伤,且显著优于低剂量组与桔梗多糖治疗组。结论该制备纳米硒的方法反应条件温和,操作方便,获得的纳米硒颗粒大小适宜,均匀且稳定。具有很强的清除超氧阴离子自由基、羟基自由基和DPPH自由基的能力,对糖尿病以及药物性肝损伤也具有很好的治疗能力,为其在降糖、保肝和抗衰老药物的研发过程中奠定基础,提供大量的理论依据。
[Abstract]:......
【学位授予单位】:佳木斯大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R943

【参考文献】

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本文编号:2325210

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