外源性硫化氢对阿霉素心肌病大鼠心肌纤维化的影响

发布时间：2018-12-08 08:20

【摘要】：目的：本研究以阿霉素诱导的心肌病大鼠为研究对象，探讨外源性硫化氢是否通过调控TGF-β1及其下游途径中MMP-2和MMP-9的表达，减轻心肌纤维化。为抑制心肌纤维化提供新的理论依据。方法:40只雄性Sprague—Dawley（SD）大鼠随机分为4个组别：①阿霉素(adriamyein，ADR，多柔比星)组(n=12)，腹腔注射ADR2.5mg／kg，1次／周；②ADR+硫氢化钠（NaHS）组(n=12)，腹腔注射ADR2.5mg／kg／周，并NaHS14μmoL／kg/天（在注射ADR1h后）。③NaHS组(n=8)，予NaHS14μmoL／kg/天。④对照组(n=8)，，腹腔注射0.9%氯化钠溶液，1ml／kg／周。连续用药10周，分别于干预前后用心脏超声心动仪检测大鼠心腔内径：包括包括左室舒张末期内径(Left ventricular end-diastolic diameter，LVEDD)、左心室收缩末期内径(Left ventricular end-systolic diameter，LVESD)、室间隔厚度(Interventricular septal thickness，IVS)及左心室后壁（Left ventricularposterior wall，LVPW）,并根据Teichholtz矫正公式计算左心室射血分数(Leftventricular ejection fraction， LVEF)和左心室内径缩短率(Left ventricularfraction-Shortening．LVFS)。给药10周后处死动物留取心肌标本进行以下研究：①取各组大鼠心脏组织行石蜡包埋切片并HE染色后，在显微镜下观察大鼠心肌组织病理变化。②用酶联免疫吸附(Enzyme-linkedimmunosorbent，ELISA)法分别检测大鼠心肌组织中硫化氢（H2S）、转化生长因子β1（transforming growth factor beta1,TGF-β1）、基质金属蛋白酶-2（Matrix metalloproteinase-2，MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（Matrixmetalloproteinase-9，MMP-9）以及I型和III型胶原的表达。③实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR，RQ-PCR)技术检测各组大鼠心肌组织中TGF-β1mRNA的表达量。结果：1.大鼠生存情况：各组大鼠的存活率分别为：对照组88%；ADR组50%；ADR+NaHS组42%；NaHS组75%。2、超声心动图检测：ADR组和ADR+NaHS组LVEDD、LVESD干预前后比较（P0.05）；干预后ADR+NaHS组LVEDD、LVESD与ADR组比较明显减小（P0.05），LVEF、LVFS与ADR组比较明显改善（P0.05），各组大鼠LVPW、 IVS比较无统计学差异（P0.05）。3.心肌组织病理学检查：ADR组心肌细胞排列紊乱，部分心肌细胞出现纤维断裂、胞质溶解等变性、坏死现象；而ADR+NaHS组大鼠心肌细胞排列正常，变性及坏死现象明显减少，仅见部分心肌细胞空泡变性；NaHS组大鼠与对照组相似心肌细胞无明显改变。4. ELISA结果：①ADR组和ADR+NaHS组大鼠心肌组织中I和III型胶原的表达与对照组比较明显升高（P0.05），ADR+NaHS组与ADR组比较明显降低（P0.05）。②ADR组大鼠心肌组织中H2S的含量与其它三组比较明显减少（P0.05）。③ADR组和ADR+NaHS大鼠心肌组织中TGF-β1的表达与对照组比较明显升高（P0.05），ADR+NaHS组与ADR组比较明显降低（P0.05），而NaHS组与对照组比较也明显减少（P0.05）。④ADR组和ADR+NaHS大鼠心肌组织中MMP-2和MMP-9的表达与对照组比较明显升高（P0.05），ADR+NaHS组与ADR组比较明显降低（P0.05），而NaHS组与对照组比较无明显改变（P0.05）。5.RQ-PCR结果：ADR组和ADR+NaHS组大鼠心肌组织中TGF-β1mRNA的相对表达量与对照组比较明显升高（P0.05），ADR+NaHS组与ADR组比较明显降低（P0.05），而NaHS组与对照组比较也减少（P0.05）。结论：补充外源性硫化氢可通过减少TGF-β1及其下游途径中MMP-2和MMP-9的表达，减轻心肌纤维化，改善大鼠心功能。
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【学位授予单位】：泸州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R965

【共引文献】