法舒地尔改善内皮祖细胞功能活性的机制研究

发布时间：2019-04-02 01:02

【摘要】：目的:研究法舒地尔对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)功能活性及一氧化氮(NO)合成的影响。方法:利用密度梯度离心法分离、培养人外周血单个核细胞,由FITC-UEA-I和Dil-acLDL双染色鉴定正在分化的EPCs。将分离、培养的EPCs分为对照组、法舒地尔组(10μmol/L)和内皮型一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME,100μmol/L)干预组。分别采用免疫荧光染色计数法、Transwell小室法、粘附实验以及体外小管形成实验观察法舒地尔干预后EPCs增殖、迁移、粘附以及血管形成能力的变化情况,同时采用Greiss法检测法舒地尔处理后EPCs合成NO的变化情况,应用Western blot计数检测法舒地尔处理EPCs后一氧化氮合酶(eNOS)和磷酸化eNOS(Ser1179)蛋白的表达变化情况。结果:与对照组相比,法舒地尔组EPCs增殖、迁移、粘附以及血管形成等功能活性显著提高,而在L-NAME组,法舒地尔改善EPCs功能活性的作用受到明显的抑制。另外,EPCs经法舒地尔处理后,NO的合成分泌水平以及磷酸化eNOS(Ser1179)表达水平均明显高于对照组(P0.05)。结论:法舒地尔具有促进EPCs增殖、迁移、粘附等功能的作用,其主要机制可能与法舒地尔促进eNOS的活性,进而增加NO的合成分泌有关。
[Abstract]:Aim: to study the effects of fasudil on the functional activity of endothelial progenitor cells (endothelial progenitor cells,EPCs) and the synthesis of nitric oxide (no) (NO). Methods: human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were isolated and cultured by density gradient centrifugation. The differentiated EPCs. was identified by FITC-UEA-I and Dil-acLDL double staining. The cultured EPCs were divided into control group, fasudil group (10 渭 mol / L) and endothelial nitric oxide synthase inhibitor (100 渭 mol / L) group. Immunofluorescence staining, Transwell chamber method, adhesion test and tubule formation test were used to observe the changes of proliferation, migration, adhesion and angiogenesis ability of EPCs after the intervention of fasudil. At the same time, the expression of nitric oxide synthase (eNOS) and phosphorylated eNOS (Ser1179) protein in EPCs treated with fasudil was detected by Greiss method and the expression of nitric oxide synthase (eNOS) and phosphorylated eNOS (Ser1179) protein were detected by Western blot counting after fasudil was treated with fasudil. Results: compared with the control group, the proliferation, migration, adhesion and angiogenesis of EPCs were significantly increased in fasudil group, while in L-NAME group, the effect of fasudil on improving EPCs functional activity was significantly inhibited. In addition, the synthesis and secretion of NO and the expression of phosphorylated eNOS (Ser1179) in EPCs treated with fasudil were significantly higher than those in control group (P0.05). Conclusion: fasudil can promote the proliferation, migration and adhesion of EPCs. The main mechanism of fasudil may be that fasudil promotes the activity of eNOS and then increases the synthesis and secretion of NO.
【作者单位】： 武汉大学人民医院心内科;湖北医药学院附属太和医院心内科;湖北医药学院;
【分类号】：R96

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：2452078