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依达拉奉对人肺腺癌A549细胞抗氧化损伤的作用研究

发布时间:2019-08-19 16:35
【摘要】:目的:建立人肺腺癌A549细胞紫外氧化损伤的模型,通过依达拉奉对该紫外氧化损伤模型的处理,探讨依达拉奉对人肺腺癌A549细胞抗氧化损伤的作用。方法:1.将不同照射剂量的紫外线UVC分组(UVC0组:0J/m2,UVC1组:10J/m2,UVC2组:20J/m2,UVC3组:40J/m2,UVC4组:80J/m2),分别照射人肺腺癌A549细胞,用MTT法测定各组的细胞存活率,从而确定A549细胞紫外氧化损伤模型的紫外线照射剂量。2.将不同浓度的依达拉奉溶液组(Eda0组:0μmol/l,Eda1组:10μmol/l,Eda2组:20μmol/l,Eda3组:40μmol/l,Eda4组:80μmol/l),分别对经紫外照射损伤的A549细胞的培养,通过MTT法测定各组细胞的增殖率,以确定最佳的依达拉奉浓度。3.将确定的紫外损伤剂量和依达拉奉的最佳浓度进行细胞实验,检测A549细胞的氧化损伤程度。将实验细胞分组:空白对照组(空白组),紫外损伤组(UVC组),紫外损伤+依达拉奉组(UVC+Eda组),采用紫外-可见分光光度计测定细胞中的氧化指标丙二醛(MDA)的含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性、超氧化物歧化酶(SOD)的活性。4.用彗星实验检测加入最佳浓度的依达拉奉对不同剂量紫外氧化损伤的A549细胞DNA的影响,分为A组(不同剂量UVC组)和B组(不同剂量UVC+依达拉奉组)。结果:1.随着紫外线照射剂量的增加,各组细胞的存活率均呈下降的趋势,经MTT试验,确定进行紫外线照射的剂量为40J/m2。2.不同浓度的依达拉奉对经紫外线照射损伤的A549细胞增殖率均有改善,Eda3组细胞的增殖率最大,确定最佳依达拉奉浓度为40μmol/l。3.肺腺癌A549细胞抗氧化指标测定:UVC组与UVC+Eda组的MDA含量均高于空白组,而UVC组与UVC+Eda组的SOD活性及GSH-PX活性均低于空白组;UVC+Eda组的MDA含量低于UVC组,UVC+Eda组的SOD活性及GSH-PX活性均高于UVC组,其差异具有统计学意义(P0.05)。表明依达拉奉对A549细胞的抗氧化指标具有明显的改善作用。4.紫外线照射会造成细胞DNA的损伤,照射剂量越大,DNA的损伤越大,当紫外线照射剂量≤40J/m2时,B组的DNA损伤率低于A组,其差异具有统计学意义(P0.05)。结论:成功建立A549细胞紫外线氧化损伤模型;依达拉奉对紫外线引起的人肺腺癌A549细胞氧化损伤具有显著的抗氧化作用。
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R96

【参考文献】

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本文编号:2528369

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