新合成吩嗪衍生物体外诱导癌细胞周期阻滞和凋亡的实验
发布时间：2019-11-03 13:36
【摘要】：目的探讨新合成吩嗪衍生物抗癌活性及其作用机制。方法 MTT法检测细胞增殖,吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)染色荧光显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期,Annexin V-FITC/7-AAD双染检测凋亡,Western blot检测p53和caspase-3蛋白的表达。结果 pn18、pn23、pc27和pc28四种化合物在体外抑制癌细胞增殖,尤其对人结直肠癌细胞HCT116作用明显,且呈时间和剂量依赖性。pc28在四种化合物中作用最强,48 h对Hep G2、HCT116和A549细胞半数抑制浓度(IC50)分别为(6.62±2.69)、(10.83±1.41)和(22.39±4.31)μmol。20μmol化合物作用于HCT116细胞24 h后,细胞密度降低,形态变圆,细胞内明亮绿色荧光与染色质浓缩相关,死亡细胞呈橙黄色和红色与细胞膜通透性增加有关;pc28诱导的细胞晚期凋亡比例由0.345%升高至19.7%。20μmol pn18和pc27诱导G0/G1期细胞分别升高17.5%和25.0%,pn23和pc28诱导S期细胞分别升高18.4%和11.0%。pn23和pc28诱导p53表达升高,pc28也能上调并激活caspase-3。结论四种合成的新型吩嗪衍生物在体外能有效抑制多种癌细胞增殖,其作用机制可能与诱导细胞周期阻滞和凋亡相关。
【图文】：
48htestedbyMTTassay(μmol/L)Cellspn18pn23pc27pc28HCPTPDDHepG220.30±2.5821.47±4.7913.96±2.346.62±2.6917.08±2.180.31±0.14A54934.57±7.0744.24±5.1923.26±4.2822.39±4.310.79±0.26NdHCT11618.48±2.4911.30±2.4612.25±2.3910.83±1.413.54±1.043.53±0.95SW62026.72±3.7510.71±1.5812.54±1.9816.50±3.324.63±1.026.92±2.13Notes:HCPT:hydroxycamptothecine;PDD:cisplatin;Nd:notdoneCellsweretreatedwithdifferentcompoundsatvariousconcentrationsfor24,48or72h;A:pn18;B:pn23;C:pc27;D:pc28图1化合物对HCT116细胞增殖的影响Figure1EffectofcompoundonproliferationofHCT116cells
nblot实验中，化合物对凋亡调控关键蛋白p53和凋亡执行关键蛋白caspase-3的表达有不同影响。化合物pn23和pc28引起p53蛋白表达升高，为对照组的1.23倍（P=0.0312）和1.17倍（P=0.0182），其他两种化合物对其影响较弱。化合物pc28对caspase-3的表达及激活有促进作用，，为对照组的1.44倍（P=0.0013）和1.14倍（P=0.0389），其他化合物作用则较弱，见图5。Cellsweretreatedwithdifferentcompounds(20μmol/L)for24handstainedwithacridineorange/ethidiumbromide(AO/EB);A:controlgroup;B:pn18;C:pn23;D:HCPT;E:pc27;F:pc28图2荧光显微镜下观察化合物对HCT116细胞形态的影响Figure2EffectofcompoundonmorphologyofHCT116cellsobservedbyfluorescentmicroscopeCellsweretreatedwithdifferentcompounds(0,10or20μmol/L)for24handanalyzedbyflowcytometry.A:pn18;B:pn23;C:pc27;D:pc28;*:P<0.05comparedwith0μmol/Lcompounds;**:P<0.01comparedwith0μmol/Lcompounds图3化合物对HCT116细胞周期的影响Figure3EffectofcompoundoncellcycleofHCT116Cellsweretreatedwithdifferentcompounds(20μmol/L)for24handapoptosiswasdetectedbyflowcytometry图4化合物对HCT116细胞凋亡的影响Figure4EffectofcompoundonapoptosisofHCT116cells
本文编号：2555108
【图文】：
48htestedbyMTTassay(μmol/L)Cellspn18pn23pc27pc28HCPTPDDHepG220.30±2.5821.47±4.7913.96±2.346.62±2.6917.08±2.180.31±0.14A54934.57±7.0744.24±5.1923.26±4.2822.39±4.310.79±0.26NdHCT11618.48±2.4911.30±2.4612.25±2.3910.83±1.413.54±1.043.53±0.95SW62026.72±3.7510.71±1.5812.54±1.9816.50±3.324.63±1.026.92±2.13Notes:HCPT:hydroxycamptothecine;PDD:cisplatin;Nd:notdoneCellsweretreatedwithdifferentcompoundsatvariousconcentrationsfor24,48or72h;A:pn18;B:pn23;C:pc27;D:pc28图1化合物对HCT116细胞增殖的影响Figure1EffectofcompoundonproliferationofHCT116cells
nblot实验中，化合物对凋亡调控关键蛋白p53和凋亡执行关键蛋白caspase-3的表达有不同影响。化合物pn23和pc28引起p53蛋白表达升高，为对照组的1.23倍（P=0.0312）和1.17倍（P=0.0182），其他两种化合物对其影响较弱。化合物pc28对caspase-3的表达及激活有促进作用，，为对照组的1.44倍（P=0.0013）和1.14倍（P=0.0389），其他化合物作用则较弱，见图5。Cellsweretreatedwithdifferentcompounds(20μmol/L)for24handstainedwithacridineorange/ethidiumbromide(AO/EB);A:controlgroup;B:pn18;C:pn23;D:HCPT;E:pc27;F:pc28图2荧光显微镜下观察化合物对HCT116细胞形态的影响Figure2EffectofcompoundonmorphologyofHCT116cellsobservedbyfluorescentmicroscopeCellsweretreatedwithdifferentcompounds(0,10or20μmol/L)for24handanalyzedbyflowcytometry.A:pn18;B:pn23;C:pc27;D:pc28;*:P<0.05comparedwith0μmol/Lcompounds;**:P<0.01comparedwith0μmol/Lcompounds图3化合物对HCT116细胞周期的影响Figure3EffectofcompoundoncellcycleofHCT116Cellsweretreatedwithdifferentcompounds(20μmol/L)for24handapoptosiswasdetectedbyflowcytometry图4化合物对HCT116细胞凋亡的影响Figure4EffectofcompoundonapoptosisofHCT116cells
本文编号：2555108
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/yiyaoxuelunwen/2555108.html
最近更新
教材专著
