抗生链霉菌H74-21的抗真菌次生代谢产物研究

发布时间：2020-01-21 08:55

【摘要】：本研究通过活性筛选获得一株来源于红树林底泥且具抗真菌活性的海洋放线菌H74-21,对其进行不同培养基条件下的小规模发酵,并对其提取物进行化学筛选以及初步的活性筛选。根据筛选结果选择最优培养基进行一定规模的放大发酵,采用活性追踪分离的方法,综合利用硅胶开放柱色谱、ODS中低压柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及制备性高效液相色谱等分离手段进行化合物的分离、纯化;利用理化性质和波谱学分析等方法对单体化合物进行结构鉴定,并对其进行活性评价。从菌株H74-21中分离鉴定22个单体,化合物16和21为两个新化合物,化合物22为新天然产物。其结构分别为:抗霉素A1a/1b(1、2)、抗霉素A7b(3)、抗霉素A2a(4)、抗霉素A8a/8b(5、6)、抗霉素A3a/3b(7、8)、cyclo-((S)-Pro-(R)-Leu)(9)、seco-((S)-Pro-(R)-Val)(10)、cyclo-(S)-Pro-8-hydroxy-(R)-Ile(11)、放线菌素D(12)、放线菌素X2(13)、deisovalerylblastomycin(14)、urauchimycin B(15)、kitamycin C(16)、kitamycin A(17)、kitamycin B(18)、2-苯基乙酰胺(19)、麦角甾醇(20)、streptomyceamide C(21)、1,4-二甲基-3-异丙基-2,5-哌啶二酮(22)。对分离所得的化合物进行抗真菌活性测试,结果显示:13个抗霉素类化合物和两个放线菌素类化合物对白色念珠菌都有不同程度的抑制作用,其MIC值分别为0.3125?g/disk,2.5?g/disk,5.0?g/disk。对分离所得的化合物进行细胞毒活性测试,结果显示:化合物1~7、12、13和14~18对乳腺癌细胞株(MCF-7)、人神经癌细胞(SF-268)、人大细胞肺癌细胞(NCI-H460)表现出较好的生长抑制作用(IC5050?g/ml),其中放线菌素(化合物12、13)细胞毒性最强(IC501.6?g/ml)。结合16S rDNA序列比对、培养特征,即基内菌丝颜色Ш76′咖啡色,气生菌丝量多色灰,且在电镜下观察,气生菌丝形成孢子丝,孢子丝直,孢子为圆柱状,和使明胶液化较慢、水解淀粉能力较强、在纤维素上不生长、不能使牛奶凝固、能使牛奶胨化的生理生化特征等鉴定H74-21为链霉菌属抗生链霉菌(Streptomyces antibioticus)。
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R915

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