异烟肼对大鼠细胞因子和巨噬细胞功能的影响

发布时间：2020-02-07 20:17

【摘要】：目的：研究异烟肼对大鼠外周血细胞因子（IL-6、IL-12、IFN-γ）和巨噬细胞功能的影响，并对其可能的影响机制进行探讨。方法：1.清洁级SD大鼠60只，雄性，2月龄（体重：150±30g），随机分为3组，分别为喂药1月组、喂药3月组、喂药3月后停药1月组，每组各20只，以上3组各组再随机等分为实验组和对照组，每组各10只。2.上述SD大鼠于相同标准条件下饲养，实验组用异烟肼灌胃，对照组用生理盐水灌胃。3.酶联免疫吸附法（ELISA法）检测大鼠外周血细胞因子IL-6、IL-12、IFN-γ的含量，琼脂平板法检测大鼠外周血溶菌酶的含量，硝酸铅法（Comori法）检测大鼠腹腔液巨噬细胞内酸性磷酸酶的活性。4.IL-6、IL-12、IFN-γ和溶菌酶相同时间点实验组与对照组两组间比较采用两独立样本t检验，，方差不齐者，采用t始煅椋煌奔涞愣哉兆樽槟谌楸冉喜捎胵检验，结果用均数±标准差(ˉx±s)表示，P0.05有统计学意义。酸性磷酸酶相同时间点实验组与对照组两组间比较采用秩和检验，不同时间点对照组组内三组比较采用Kruskal-Wallis H检验，若有统计学意义，可进一步用Nemenyi检验作两两比较，结果用平均秩次表示，P0.05有统计学意义。结果：1.相同时间点实验组与对照组IL-12、IFN-γ和溶菌酶含量进行比较，差异均无统计学意义（P0.05）。2.喂药1月组实验组与对照组酸性磷酸酶进行比较，实验组高于对照组，差异有统计学意义（P0.05），余差异无统计学意义（P0.05）。3.不同时间点对照组组内IL-12和溶菌酶比较，差异有统计学意义（P0.05）；不同时间点对照组组内IFN-γ和酸性磷酸酶比较，差异均无统计学意义（P0.05）。4.本实验未检测出IL-6，可能由于该实验大鼠体内IL-6含量低于该ELISA试剂盒检测下限。结论：1.随着大鼠月龄增加，大鼠血清IL-12含量和溶菌酶含量降低。2.异烟肼可能增加大鼠血清IL-12含量，停药后可恢复；异烟肼对大鼠血清IFN-γ和血清溶菌酶含量无明显影响；异烟肼能短暂增强大鼠腹腔液巨噬细胞内酸性磷酸酶活性，但长期作用不明显。3.异烟肼对免疫功能影响相对较小，未发现免疫抑制作用。
【图文】：

实验大鼠,异烟肼,灌胃

以上 3 组各组再随机等分为实验组和对照组，每组各 10 只。大鼠尾部编号。验动物的饲养方法：有大鼠在标准环境（阴暗、安静环境，温度 23℃±3℃，相对10%）下适应性喂养一周。验组：每次灌胃前称重大鼠，并记录。将异烟肼片研磨成粉末理盐水配制成异烟肼药液，大鼠灌胃异烟肼药液剂量为成人使物剂量的 6 倍（120mg/kg），配制成 12mg/ml 的异烟肼药液。异烟肼药液按每 100g 大鼠体重灌胃 1ml，隔日一次灌胃。照组：用 0.9%生理盐水按每 100g 大鼠体重灌胃 1ml，隔日一次条件同实验组。（见图 1）

大鼠,剑突,血液,碘酒

使大鼠头部与躯干部处于一条直线，充分暴露大鼠躯干部。实验动物采血方法：将大鼠剑突周围用碘酒及酒精消毒后，操作者右手持 5ml 注射贴剑突下方与胸壁成 30°角，微向左位于心脏方向进针 2.5～针边缓慢回抽，当阻力消失、回血量多时即为心脏血。采集 3m后拔出针头，将采集到的血液静置于促凝管中，以左手拇指按部位约 1min。将促凝管中的血液以 3000r/min 离心 20min，分细胞，并将血清分装于无菌 EP 管中，置于-80℃超低温冰箱中（见图 2）
【学位授予单位】：泸州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R965

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