青蒿琥酯联合索拉非尼抗肿瘤作用的研究

发布时间：2020-03-18 13:15

【摘要】：目的:多酪氨酸激酶抑制剂索拉非尼(SOR,sorafenib)激酶抑制剂,被批准用于肾细胞癌、肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)及 FLT3-ITD 阳性 AML(急性髓性白血病)的治疗,可显著提升肝癌晚期患者的总体生存率。但价格昂贵长期使用易诱导耐药,限制了 SOR的临床使用。因此,增强SOR药物敏感性是当前抗癌治疗的难题之一。已知,当SOR与PI3K抑制剂组合使用时,可显著增强索拉非尼抗癌作用。并且有报道显示青蒿琥酯(ARS,artesunate)可通过作用于PI3K/mTOR信号通路发挥抗癌作用。本文旨在明确青蒿琥酯对索拉非尼的抗癌增敏作用,并探讨其相应的分子机制。方法:1.应用MTS测得对照(CON,control)SOR、ARS及SOR+ARS组系列浓度的OD值,计算每组IC50值,并确定SOR/ARS联合使用比例。2.用台盼蓝染色分别统计CON、SOR、ARS及其联合组的活、死细胞数,进一步验证SOR与ARS联合用药对肿瘤增殖的抑制作用。3.通过划痕实验检测CON、SOR、ARS、SOR+ARS联用对SK-HEP1(人肝腹水腺癌细胞)及HN30(人头颈鳞状细胞癌细胞)细胞迁移的改变。4.PI-ANNXIN V双染后流式仪检测SOR、ARS及SOR+ARS对SK-HEP1及HN30细胞凋亡情况的影响。5.流式细胞技术验证SOR、ARS及联合对SK-HEP1及HN30细胞周期是否存在阻滞作用。6.Western blot 法检测 SOR、ARS、SOR+ARS 各组的 p-mTOR,,p-ERK,p-AKT等蛋白的蛋白表达水平。7.采用Graphad 7.0软件进行数据分析,IC50计算采用Sigmoidal dose-response法,两组间计量数据比较采用two-tailed Student's t检验法。结果:MTS实验提示SOR,ARS联用组对SK-HEP1,HN30细胞增殖的抑制作用显著高于单独用药组且伴随浓度依赖效应,且CI1;SK-HEP1和HN30细胞中SOR+ARS联合组凋亡率高于其他组(P0.05);划痕试验结果表明,SOR+ARS联合组的划痕愈合率变慢,低于SOR、ARS刺激组。SOR+ARS联合用药无明显诱导细胞周期改变作用。Western Blot结果表明,ARS+SOR联合用药组可显著下调HN30细胞及Sk-hep1细胞中p-AKT和p-ERK等蛋白的表达水平。结论:在SK-HEP1及HN30细胞学实验中ARS与SOR联合用药有正向协同作用,并可显著增强对肿瘤细胞增殖和迁移的抑制效果,促进诱导SK-HEP1及HN30细胞的凋亡。ARS与SOR通过联合抑制PI3K/mTOR及MAPK/ERK信号通路诱导肿瘤细胞凋亡。本研究可能为增强抗肿瘤药物SOR敏感性及减弱其副作用提供了新的思路。
【图文】：

图１：逦ＨＣＣ及其靶信号通路的分子靶向治疗

图２：索拉非尼（ＳＯＲ）和青蒿琥酯联合对ＳＫ－ＨＥＰ１细胞增殖的影响逡逑Ｆｉｇ２邋：邋Ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ邋ｔｒｅａｔｍｅｎｔ邋ｗｉｔｈ邋ｓｏｒａｆｅｎｉｂ邋（ＳＯＲ）邋ａｎｄ邋Ａｒｔｅｓｕｎａｔｅ邋ｏｎ邋ｃｅｌｌ逡逑ｇｒｏｗｔｈ邋ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ＳＫ－ＨＥＰ１：逡逑－－
【学位授予单位】：安徽理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R96

【参考文献】

相关期刊论文 前2条

1 朱江川;;青蒿琥酯治疗儿童疟疾疗效观察[J];中国药物与临床;2012年10期

2 刘旭;抗疟药青蒿琥酯的研究[J];药学进展;1999年01期

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本文编号：2588767