维生素D对糖皮质激素免疫抑制模型小鼠的免疫调节作用

发布时间：2017-03-25 17:15

  本文关键词：维生素D对糖皮质激素免疫抑制模型小鼠的免疫调节作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的通过观察维生素D对糖皮质激素诱导的免疫抑制模型小鼠免疫学指标的影响,探讨维生素D对免疫功能低下的调节作用及部分机制。方法实验小鼠随机分成5组:对照组、模型组和维生素D低、中、高剂量组。模型组小鼠连续3天腹腔注射地塞米松(25 mg/kg体重)建立免疫抑制小鼠模型,对照组小鼠连续3天腹腔注射与地塞米松相同体积的注射用水;低、中、高剂量组小鼠在建立模型的基础上,于腹腔注射地塞米松的第一天,同时分别给予三个不同剂量(4、6、10 IU/g体重)1,25(OH)2D3灌胃处理,模型组和对照组于注射的第一天,同时灌胃给予0.2ml的注射用水,连续7天;。于实验的第8天,小鼠称重,摘眼球取血,EDTA抗凝,然后断颈处死小鼠,无菌取脾和胸腺,分别称重,计算小鼠胸腺、脾脏指数;制备脾细胞悬液,经过刀豆素A(T淋巴细胞活化剂)刺激后,采用MTT法检测小鼠脾脏T淋巴细胞增殖指数,同时吸取细胞培养上清,采用酶联免疫吸附实验检测白细胞介素-2的浓度;采用全自动血细胞分析仪检测小鼠外周血白细胞总数及分类,采用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞及其亚群、B淋巴细胞及NK细胞的百分比。结果1.模型组小鼠胸腺指数、脾脏指数、脾脏淋巴细胞增殖指数、外周血淋巴细胞百分比、脾脏T淋巴细胞产生白细胞介素-2的能力及外周血B淋巴细胞、除NK T淋巴细胞以外的T淋巴亚群均明显低于对照组,而NK T淋巴细胞百分比与对照组相比明显增高。2.维生素D不同剂量组小鼠胸腺指数均明显高于模型组,并且随着剂量增高,胸腺指数有增高的趋势;而给予不同剂量的维生素D对小鼠的脾脏指数无明显影响。3.维生素D中剂量组淋巴细胞增殖指数明显高于模型组,但仍低于对照组的增殖指数;维生素D低剂量组和维生素D高剂量组与模型组相比较,增殖指数无明显差异。4.维生素D中剂量组小鼠脾淋巴细胞培养上清液中白细胞介素-2的浓度明显高于模型组;但维生素D低剂量组和维生素D高剂量组与模型组相比,白细胞介素-2水平无明显差异。5.维生素D中剂量组外周血淋巴细胞数量明显高于模型组;而白细胞是随着维生素D使用药剂量的增加而逐渐升高。6.维生素D低剂量组外周血B淋巴细胞百分比明显高于模型组。维生素D中剂量组及维生素D高剂量组与模型组无明显差异。7.维生素D低剂量组外周血自然杀伤细胞百分比与模型组相比有增高的趋势。而维生素D高剂量组自然杀伤细胞百分比明显低于模型组。当维生素D给药剂量增加时,自然杀伤细胞百分比有降低的趋势。8.维生素D低剂量组CD4~+淋巴细胞百分比低于模型组,随着维生素D给药剂量的增加,CD4~+淋巴细胞百分比逐渐增高。维生素D低剂量组的CD8+淋巴细胞百分比较模型组明显降低。维生素D中剂量组与维生素D高剂量组CD4~+/CD8+值较模型组明显升高,而维生素D低剂量组与模型组不具有明显差异,随维生素D给药剂量增高,CD4~+/CD8+值也随之增高。结论维生素D可以改善糖皮质激素诱导的免疫抑制小鼠的免疫功能,不同剂量的维生素D对免疫调节作用存在差异,其中,中等剂量(6IU/g)维生素D补充对免疫功能的调节作用最强;进一步增高维生素D剂量对免疫的调节作用相对减弱。总之,维生素D可以促进免疫功能低下小鼠免疫功能的恢复,可能通过调节T淋巴细胞增殖及分泌细胞因子如白细胞介素-2的水平对免疫功能进行调节。
【关键词】：维生素D免疫 白细胞介素-2 T淋巴细胞 B淋巴细胞 自然杀伤细胞
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R-332;R965
【目录】：

• 英文缩略词6-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 1 前言12-15
• 2 实验材料15-16
• 2.1 动物15
• 2.2 药物与试剂15-16
• 2.3 主要实验仪器16
• 3 实验方法16-20
• 3.1 糖皮质激素诱导的免疫抑制小鼠模型的建立16-17
• 3.2 实验动物分组及给药方法17
• 3.3 小鼠体重、胸腺指数、脾脏指数的测定17
• 3.4 小鼠脾脏淋巴细胞增殖指数测定17-18
• 3.5 细胞因子IL-2 的测定18
• 3.7 B、NK、T淋巴细胞亚群的测定18-19
• 3.6 外周血白细胞数量检测19
• 3.8 统计学处理19-20
• 4 结果20-27
• 4.1 维生素D对小鼠体重、胸腺指数、脾脏指数的影响20-21
• 4.2 维生素D对小鼠脾脏淋巴细胞增殖的影响21
• 4.3 维生素D对细胞因子IL-2 分泌的影响21-22
• 4.4 维生素D对小鼠外周血白细胞及淋巴细胞数量的影响22-23
• 4.5 维生素D对小鼠外周血T淋巴细胞亚群百分比及比值影响23-26
• 4.6 维生素D对小鼠外周血B淋巴细胞百分比的影响26
• 4.7 维生素D对小鼠外周血NK细胞百分比的影响26-27
• 5 讨论27-36
• 5.1 维生素D对小鼠胸腺指数、脾脏指数的影响27-28
• 5.2 维生素D对小鼠脾脏淋巴细胞增殖的影响28-29
• 5.3 维生素D对细胞因子IL-2 分泌的影响29-30
• 5.4 维生素D对小鼠外周血白细胞及淋巴细胞总数量的影响30
• 5.5 维生素D对小鼠外周血T淋巴细胞亚群百分比及比值影响30-33
• 5.6 维生素D对小鼠外周血B淋巴细胞百分比的影响33-34
• 5.7 维生素D对小鼠外周血NK细胞百分比的影响34-35
• 5.8 维生素D的不同剂量对免疫调节作用35-36
• 6 结论36-37
• 参考文献37-44
• 附录44-45
• 致谢45-46
• 综述46-55
• 参考文献52-55

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

1 周大勇;王君妍;刘潇阳;林竹一;郑琳;阴法文;辛丘岩;;南极磷虾油对小鼠免疫功能的调节作用[J];大连工业大学学报;2015年02期

2 么焕新;柴颖;张永敬;;维生素D治疗对2型糖尿病合并呼吸道感染患者细胞免疫功能的影响研究[J];实用心脑肺血管病杂志;2015年01期

3 宋淑军;刘俊丽;徐冰心;王晓菲;王宗烨;谭小青;司少艳;;维生素D对糖皮质激素免疫抑制模型小鼠免疫功能的影响[J];中华临床医师杂志(电子版);2013年23期

4 王超;吴静;侯光辉;陈剑;齐文娟;崔裕波;张瑾;;1,25-二羟维生素D_3对T淋巴细胞的免疫调节作用[J];广东医学;2013年20期

5 祁晓平;李培;恽时峰;黎介寿;;1,25-二羟基维生素D_3对大鼠体重、血生化及CD4~+CD25~+Treg细胞的影响[J];中国新药与临床杂志;2012年10期

6 林得志;张泽华;李力韬;常正奇;杨会峰;许建中;;维生素D缺乏对脊柱结核患者T淋巴细胞亚群影响的研究[J];中国矫形外科杂志;2012年05期

7 叶玉兰;李作孝;叶雪梅;;1,25-二羟维生素D_3对豚鼠实验性变态反应性脑脊髓炎血淋巴细胞亚群的影响[J];中国全科医学;2008年05期

8 祁晓平;黎介寿;李培;李刚;孙正;吴晓宇;;1,25-二羟维生素D_3对Th1优势应答大鼠免疫功能的影响[J];解放军医学杂志;2006年11期

9 张景迎,陈诗书;白介素-2受体及其介导的信号转导[J];生命的化学;1999年03期

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本文编号：267532