致孔肽修饰的阿霉素脂质体的构建和评价

发布时间：2020-06-03 09:16

【摘要】：阿霉素(doxorubicin,DOX)是一种蒽环类抗生素,具有广谱抗肿瘤作用。DOX对正常细胞和病变细胞均具有较强毒性,因此阿霉素用于抗肿瘤治疗的关键是找到一种合适的方法,能够在提高其靶向性的同时降低其毒性。脂质体(liposome)是将药物包裹于类脂质双分子层内形成的微型囊泡。脂质体作为一种药物输送系统,具有提高药物靶向性并降低药物毒性等优点。对脂质体进行适当靶向修饰可进一步增强抗肿瘤效果同时降低毒副作用。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一种在肿瘤组织过表达的酶,该类酶可降解细胞外基质(extracellular matrix,ECM)中的各种蛋白成分,而ECM是肿瘤细胞侵袭的组织学屏障,所以MMPs在肿瘤侵袭及转移中具有重要作用。致孔肽(pore-forming peptide)是一种线性阳离子肽,该类肽可有效渗入脂质膜并且在脂质膜内自组装形成孔道,从而实现膜内小分子物质的释放。以MMP敏感的致孔肽修饰脂质体,可使脂质体内包裹的小分子药物快速释放于肿瘤部位,增大药物在肿瘤部位的浓度,增强药物作用效果。本文采用硫酸铵梯度法制备阿霉素脂质体,通过测定脂质体的粒径和包封率对其进行表征。以致孔肽和聚乙二醇为原料合成系列功能性聚合物,然后使用合成的功能性聚合物修饰阿霉素脂质体,构建了致孔肽修饰的阿霉素脂质体。这种致孔肽修饰的阿霉素脂质体对基质金属蛋白酶较为敏感,本文使用基质金属蛋白酶对脂质载体的酶敏感性能进行了评价。第一部分脂质载体制备和表征目的:完成饱和磷脂组脂质载体及不饱和磷脂组脂质载体的制备,并对两种脂质载体进行表征。方法:使用薄膜分散法制备空白脂质载体,采用硫酸铵梯度法装载阿霉素,制备载药脂质体。以粒径及包封率为指标,对载药脂质载体进行表征。结果:本文共制备了两种脂质载体,分别为不饱和磷脂组脂质载体(US组)及饱和磷脂组脂质载体(S组)。所制备的脂质体载体外观色泽均一,粒径呈正态单峰分布,均在100 nm~110 nm,PDI较小,包封率均大于90%。结论:本研究中脂质体的制备方法简单、重现性好、且所得脂质体包封率高。第二部分脂质载体通透性考察目的:通过释放度试验考察致孔肽对脂质载体的通透性。方法:通过考察盐酸阿霉素溶液在不同条件下的扩散情况,筛选出释放度试验的最佳条件,然后采用释放度试验法考察致孔肽对脂质载体的通透性。结果:脂质载体通透性考察结果表明,本实验所用各种致孔肽对脂质载体均具有通透性,且一定范围内,随着脂材中致孔肽摩尔百分比的增加,通透性逐渐增大。结论:研究表明,不同致孔肽对载阿霉素脂质体均具有通透作用,且大部分致孔肽对脂质载体的通透能力相对较强,可用于后续研究。第三部分脂质载体酶敏感性能评价目的:建立脂质载体酶敏感性能的评价方法并对脂质载体进行初步酶敏感性能评价。方法:以致孔肽和聚乙二醇为原料,利用迈克尔加成反应制备了多种功能性聚合物,使用所制备的功能性聚合物修饰载药脂质体,构建了对基质金属蛋白酶敏感的阿霉素脂质体,使用基质金属蛋白酶对所构建的阿霉素脂质体的酶敏感性能进行考察。结果:脂质载体酶敏感性能评价部分,通过大量的试验,最终筛选出了可用于考察脂质载体酶敏感性能的酶活化条件。之后使用致孔肽和不同类型的PEG合成了系列功能性聚合物,并借助合成的功能性聚合物进行载体修饰,构建了致孔肽修饰的阿霉素脂质体。最后,建立了脂质载体酶响应性能的评价方法,借助该方法进行考察,载体可以实现酶敏释药。结论:通过考察胶原酶作用下脂质载体中阿霉素的泄露,本研究对载体酶敏感性能进行评价,结果表明载体具备明显的酶敏感特性。
【图文】：

粒径分布,粒径分布

图 1-1 US-DOX 粒径分布Fig. 1-1 The size distribution of US-DOX图 1-2 S-DOX 粒径分布Fig. 1-2 The size distribution of S-DOX

粒径分布,粒径分布

S-DOX粒径分布
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R943

【参考文献】