皂苷类化合物与脂肪酶相互作用的生化机理

发布时间：2017-03-30 04:20

  本文关键词：皂苷类化合物与脂肪酶相互作用的生化机理，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：肥胖症被世界卫生组织列为威胁人类健康十大疾病之一,严重影响人类身心健康和生活品质。研究表明,抑制胰脂肪酶活力是防治肥胖症的关键。皂苷类化合物能有效抑制胰脂肪酶活性,但是,它们之间相互作用生化机理并不十分清楚。为此,本文以5个皂苷类化合物(TS, OA, B, Ro, Rd)为模型,阐明皂苷类化合物与胰脂肪酶相互作用生化机制,为脂肪酶抑制剂开发奠定理论基础。主要成果如下：1.不同种类皂苷类化合物(TS, OA, B, Ro, Rd)抑制胰脂肪酶活性及其类型不一样,配基起到了决定性作用。TS竞争性抑制脂肪酶活力,其它4种类似物非竞争性抑制脂肪酶活力。抑制酶活力大小依次为Ro (69.8%)OA(68.6%)B(40%)TS (25.7%)Rd(7.69%)。2.分别从动力学、热力学和蛋白构象等方面,探明了不同种类皂苷类化合物(TS, OA, B, Ro, Rd)抑制胰脂肪酶酶活机理。5种皂苷类化合物静态淬灭PL荧光,结合能力与抑制剂分子量有关。皂营类化合物与PL相互作用时,会改变PL蛋白构象和热力学特性。3.表观形态学(AFM电镜分析)和溶解度研究表明,皂苷类化合物(TS, OA, B, Ro, Rd)可以促使溶液中胰脂肪酶发生松散的可溶解的团聚,促进能力Rd≈RoTS≈OAB。
【关键词】：皂苷类化合物 胰脂肪酶 肥胖症 分子机理
【学位授予单位】：北京化工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R96
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-14
• 第一章 绪论14-22
• 1.1 肥胖症的产生及其机理14-17
• 1.1.1 肥胖症的定义、评价方法14-16
• 1.1.2 肥胖症的流行病学现状16-17
• 1.1.3 肥胖症的产生机理17
• 1.2 抑制脂肪酶活力是减缓肥胖症发生的关键17-21
• 1.2.1 脂肪酶在肥胖症中的作用17-19
• 1.2.2 天然来源的胰脂肪酶抑制剂研究现状19-20
• 1.2.3 皂苷类化合物对脂肪酶活力抑制效果研究20-21
• 1.3 课题研究目的与主要研究内容21-22
• 第二章 皂甙类化合物抑制PL活性与抑制类型22-31
• 2.1 实验材料和仪器22-23
• 2.2 实验方法23-25
• 2.2.1 摩尔浓度比R的引入23
• 2.2.2 PL蛋白含量与水解活力测定23-24
• 2.2.3 皂苷类化合物溶液的配制24
• 2.2.4 皂苷类化合物对脂肪酶活力抑制率分析与EC50值24
• 2.2.5 皂苷类化合物对脂肪酶活力抑制类型判断24-25
• 2.3 结果与讨论25-30
• 2.3.1 PL蛋白含量与水解活力分析结果25-26
• 2.3.2 皂苷类化合物溶液配制的助溶剂选择26-27
• 2.3.3 皂苷类化合物对脂肪酶水解活力抑制率与EC50值计算27-29
• 2.3.4 皂苷类化合物对脂肪酶水解活力抑制类型29-30
• 2.4 本章小结30-31
• 第三章 皂苷类化合物对PL构象的影响31-38
• 3.1 实验材料与仪器31-32
• 3.2 实验方法32
• 3.2.1 样品配制32
• 3.2.2 圆二色光谱测定32
• 3.2.3 荧光光谱测定32
• 3.3 结果与讨论32-37
• 3.3.1 皂苷类化合物对胰脂肪酶二级结构的影响32-35
• 3.3.2 荧光光谱研究胰脂肪酶三级结构变化35-37
• 3.4 本章小结37-38
• 第四章 皂苷类化合物与PL相互作用动力学和热力学38-44
• 4.1 实验材料与仪器38-39
• 4.2 实验方法39
• 4.2.1 样品配制39
• 4.2.2 荧光光谱分析39
• 4.2.3 差示扫描微量量热法分析39
• 4.3 结果与讨论39-43
• 4.3.1 皂苷类化合物对胰脂肪酶荧光淬灭类型39-41
• 4.3.2 皂苷类化合物与PL相互作用的结合常数和结合位点数41-42
• 4.3.3 皂苷类化合物与PL相互作用的热力学研究42-43
• 4.4 本章小结43-44
• 第五章 皂苷类化合物对PL表观形态和溶解度的影响44-50
• 5.1 实验材料与仪器44-45
• 5.2 实验方法45
• 5.2.1 样品配制45
• 5.2.2 水力学半径测定45
• 5.2.3 BCA法测定上清液蛋白浓度变化45
• 5.2.4 AFM电镜观察45
• 5.3 结果与讨论45-49
• 5.3.1 皂苷类化合物对胰脂肪酶水力学半径的影响45-46
• 5.3.2 胰脂肪酶团聚体的溶解性及形态46-48
• 5.3.3 胰脂肪酶团聚体的AFM48-49
• 5.4 本章小结49-50
• 第六章 全文总结50-51
• 参考文献51-58
• 符号说明58-59
• 致谢59-61
• 研究成果及发表的学术论文61-62
• 作者和导师简介62-63
• 北京化工大学专业学位硕士研究生学位论文答辩委员会决议书63-64

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