壳聚糖席夫碱合成及其对灰霉菌抑菌机制

发布时间：2017-04-02 19:13

  本文关键词：壳聚糖席夫碱合成及其对灰霉菌抑菌机制，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究化学合成的四种壳聚糖席夫碱(CTS-Sal、CTS-2Hy、CTS-Val、CTS-O-val)对灰霉菌的抑菌活性,及其中抑菌活性最佳者的抑菌机制。方法:采用红外光谱(FT-IR)和紫外分光光谱(UV)对席夫碱结构进行表征;通过微量液体稀释法和真菌菌丝生长速率法测定了CTS(原料)和四种席夫碱对灰霉菌的最小抑菌浓度(MIC)和半数有效浓度(EC50);席夫碱(抑菌活性最佳者)处理灰霉菌后,通过对菌丝显微结构观察以及菌体细胞细胞壁、细胞膜、细胞核三个层次的生理生化指标的测定来研究其抑菌机制;数据采用SPSS17.0统计软件包进行数据整理、录入、分析;计量资料均使用(SX±)来表示;多组资料间比较采用重复测量的两因素方差分析(MANOVA of repeated measuring)及简单效应分析(simple effect analysis).结果:1.红外图谱和紫外图谱分析表明四种醛已经结合于CTS载体;2.与CTS(对照组)相比,四种席夫碱对灰霉菌均有明显抑制作用,其中CTS-2Hy的MIC值和EC50值均最小,分别为1184.49和724.44μg/m L;3.经过CTS-2Hy处理后的灰霉菌在透射电镜下观察,发现菌体细胞的细胞壁模糊不清甚至严重缺失,细胞壁完整性被破坏、细胞膜亦发生断裂,细胞核无明显变化,而CTS处理组细胞结构完整;相同的处理时间组CTS-2Hy组的几丁质含量均低于CTS组(P0.01);4.12h、16h、20h时CTS-2Hy组电导率均高于CTS组(P0.01);20h时CTS-2Hy可溶性蛋白渗透量高于CTS组(P0.01);8h、12h、16h、20h时CTS-2Hy可溶性还原糖含量均高于CTS组(P0.01);5.4h、8h、16h、64h时CTS-2Hy组β-1,3葡聚糖合成酶活性低于CTS组(P0.01);16h和32h时CTS-2Hy组几丁质酶活性高于CTS组(P0.01);6.对应相同时间组,CTS-2Hy组过氧化氢酶活性均低于CTS组(P0.01);7.CTS-2Hy和CTS不同浓度分别作用于灰霉菌后,基因组DNA含量的差异无统计学意义(P0.05)。结论:1.四种醛与壳聚糖均发生了席夫碱反应;四种席夫碱中,CTS-2Hy对灰霉菌的抑菌效果最佳;2.CTS-2Hy作用在细胞膜上,改变了细胞膜的通透性,CTS-2Hy通过破坏细胞膜来影响膜上和胞内相关酶的活性;一是几丁质酶活性增强、β-1,3葡聚糖合成酶活性降低,致使几丁质加速分解、葡聚糖的合成受阻,从而导致细胞壁完整性被破坏;过氧化氢酶活性下降,导致解毒作用降低,影响细胞的代谢活动,导致灰霉菌被抑制或死亡;3.CTS-2Hy对细胞核有无影响有待进一步研究。
【关键词】：壳聚糖席夫碱 灰霉菌 抑制作用 作用机制
【学位授予单位】：贵阳医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R914.5;R96
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-10
• 略缩词表10-11
• 0 引言11-14
• 1. 材料与方法14-26
• 1.1 材料14-17
• 1.2 方法17-26
• 2. 结果26-46
• 2.1 壳聚糖席夫碱光谱分析26-28
• 2.2 灰霉菌抑菌活性实验28-32
• 2.3 CTS-2Hy处理对灰霉菌菌丝的形态影响32-34
• 2.4 CTS-2Hy对灰霉菌菌丝体内含物渗漏的影响34-38
• 2.5 CTS-2Hy对灰霉菌几丁质含量的影响38-42
• 2.6 CTS-2Hy对灰霉菌菌体相关酶活性的影响42-44
• 2.7 CTS-2Hy对灰霉菌DNA的影响44-46
• 3. 讨论46-50
• 3.1 机制研究实验方法探讨46-47
• 3.2 壳聚糖席夫碱的抑菌活性实验探讨47
• 3.3 显微结构观察47
• 3.4 生理生化指标实验47-50
• 4. 结论50-51
• 参考文献51-55
• 综述55-66
• 参考文献62-66
• 作者简历66-67
• 致谢67-68
• 学位论文数据集68

【参考文献】

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本文编号：283019