褐藻胶寡糖通过调控microRNA-34a改善线粒体功能延缓D-gal诱导的H9c2心肌细胞衰老
发布时间：2020-12-27 10:17
目的:探讨microRNA-34a（miR-34a）在褐藻胶寡糖（AOS）延缓D-半乳糖（D-gal）诱导的心肌细胞衰老中的作用及其可能的分子机制。方法:实验分六组:对照（Control）组、模型（D-gal）组、D-半乳糖+褐藻胶寡糖（D-gal+AOS）组、褐藻胶寡糖（AOS）组、D-半乳糖+褐藻胶寡糖+microRNA-34a mimic（D-gal+AOS+mi R-34a mimic）组、D-半乳糖+褐藻胶寡糖+microRNA-Negative Control（D-gal+AOS+miR-NC）组。D-gal+AOS+miR-34a mimic和D-gal+AOS+miR-NC组分别用LipofectamineTMM 3000转染mi R-34a mimic（50nM）和miR-NC（50nM）,4-6h后换液。D-gal、D-gal+AOS、D-gal+AOS+miR-34a mimic和D-gal+AOS+miR-NC组细胞用D-gal（200m M）干预48h诱导心肌细胞衰老模型。48h后D-gal+AOS、AOS、D-gal+AOS+miR-3...
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组细胞中miR-34a的表达结果
结果17图3（A）JC-1染色的心肌细胞线粒体膜电位变化，×200倍镜。（B）Image-ProPlus软件计算线粒体膜电位的定量数据。**p<0.01与Control组比较；##p<0.01与D-gal组比较；※※p<0.01与D-gal+AOS+miR-NC组比较。4Westernblot检测心肌细胞中相关蛋白的表达4.1心肌细胞中衰老相关蛋白p16、p21和p53的表达本实验应用Westernblot方法检测各组心肌细胞中衰老相关蛋白p16、p21和p53的表达情况。如图4所示，与Control组相比，D-gal诱导衰老后，心肌细胞衰老相关蛋白p16、p21和p53的表达增加，差异有统计学意义（p<0.01）。与D-gal组比较，D-gal+AOS组心肌细胞衰老相关蛋白p16、p21和p53的表达减少，差异有统计学意义（p<0.01）。与D-gal+AOS+miR-NC组比较，D-gal+AOS+miR-34amimic组心肌细胞衰老相关蛋白p16、p21和p53的表达增加，差异有统计学意义（p<0.01）。B
青岛大学硕士学位论文184.2心肌细胞中SIRT1和PGC1α蛋白的表达本实验应用Westernblot方法检测各组心肌细胞中SIRT1和PGC1α蛋白的表达情况。如图5所示，与Control组相比，D-gal诱导衰老后心肌细胞中SIRT1和PGC1α蛋白的表达减少，差异有统计学意义（p<0.01）。与D-gal组比较，D-gal+AOS组SIRT1和PGC1α蛋白的表达增加，差异有统计学意义（p<0.01）。与D-gal+AOS+miR-NC组比较，D-gal+AOS+miR-34amimic组心肌细胞中SIRT1和PGC1α蛋白的表达减少，差异有统计学意义（p<0.05）。图4各组细胞中p16、p21和p53蛋白的表达。A：Westernblot检测p16、p21和p53蛋白表达；B：各组细胞中p16、p21和p53蛋白的相对表达量。**p<0.01与Control组比较；##p<0.01与D-gal组比较；※※p<0.01与D-gal+AOS+miR-NC组比较。
本文编号：2941570
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组细胞中miR-34a的表达结果
结果17图3（A）JC-1染色的心肌细胞线粒体膜电位变化，×200倍镜。（B）Image-ProPlus软件计算线粒体膜电位的定量数据。**p<0.01与Control组比较；##p<0.01与D-gal组比较；※※p<0.01与D-gal+AOS+miR-NC组比较。4Westernblot检测心肌细胞中相关蛋白的表达4.1心肌细胞中衰老相关蛋白p16、p21和p53的表达本实验应用Westernblot方法检测各组心肌细胞中衰老相关蛋白p16、p21和p53的表达情况。如图4所示，与Control组相比，D-gal诱导衰老后，心肌细胞衰老相关蛋白p16、p21和p53的表达增加，差异有统计学意义（p<0.01）。与D-gal组比较，D-gal+AOS组心肌细胞衰老相关蛋白p16、p21和p53的表达减少，差异有统计学意义（p<0.01）。与D-gal+AOS+miR-NC组比较，D-gal+AOS+miR-34amimic组心肌细胞衰老相关蛋白p16、p21和p53的表达增加，差异有统计学意义（p<0.01）。B
青岛大学硕士学位论文184.2心肌细胞中SIRT1和PGC1α蛋白的表达本实验应用Westernblot方法检测各组心肌细胞中SIRT1和PGC1α蛋白的表达情况。如图5所示，与Control组相比，D-gal诱导衰老后心肌细胞中SIRT1和PGC1α蛋白的表达减少，差异有统计学意义（p<0.01）。与D-gal组比较，D-gal+AOS组SIRT1和PGC1α蛋白的表达增加，差异有统计学意义（p<0.01）。与D-gal+AOS+miR-NC组比较，D-gal+AOS+miR-34amimic组心肌细胞中SIRT1和PGC1α蛋白的表达减少，差异有统计学意义（p<0.05）。图4各组细胞中p16、p21和p53蛋白的表达。A：Westernblot检测p16、p21和p53蛋白表达；B：各组细胞中p16、p21和p53蛋白的相对表达量。**p<0.01与Control组比较；##p<0.01与D-gal组比较；※※p<0.01与D-gal+AOS+miR-NC组比较。
本文编号：2941570
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