甘露糖对巨噬细胞炎症反应的双向调节作用

发布时间：2021-01-06 20:31

　　【目的】探讨甘露糖（Man）对炎症反应的调控及其机制,为甘露糖在炎症疾病中的应用提供依据。【方法】利用不同浓度的甘露糖处理RAW264.7巨噬细胞24 h或48 h,细胞计数检测增殖情况。低浓度（2 mmol/L）和高浓度（20 mmol/L）Man预处理RAW264.7细胞12 h,然后脂多糖（LPS）处理8 h或24 h,收集mRNA、蛋白质及培养上清,通过Q-PCR、Western blot和ELISA检测炎症相关指标以及甘露糖受体（CD206）的变化。【结果】在5 mmol/L以下,细胞增殖随Man的浓度增加而增加;在5 mmol/L以上,则相反。和LPS处理相比,LPS+甘露糖2 mmol/L（Man2）能够增高IL-1β、IL-12和TNF-α的mRNA水平以及蛋白水平（均P<0.05）;LPS+Man20显著抑制IL-1β、IL-12、TNF-α、IL-6和CCL2的mRNA水平和蛋白水平（均P<0.05）。网络药理学预测甘露糖及其代谢产物的潜在作用靶点有包括AKT和STAT3在内的20个蛋白。Man2可协同LPS刺激AKT和STAT3的磷酸化（均P<0... 

【文章来源】：中山大学学报(医学科学版). 2020,41(04)北大核心

【文章页数】：9 页

【部分图文】：

不同浓度甘露糖对RAW246.7细胞增殖的影响

和对照组相比，LPS能够显著刺激巨噬细胞中IL-1β（P=0.000）、IL-6(P=0.000）、IL-12(P=0.000）、TNF-α（P=0.000）和CCL2(P=0.000）蛋白的分泌（图3）。和LPS单独处理相比，2 mmol/L甘露糖能够协同LPS对巨噬细胞IL-1β（P=0.000 9）、IL-6(P=0.047）、IL-12(P=0.000 9）、TNF-α（P=0.002）和CCL2(P=0.002 2）蛋白分泌的刺激，而20mmol/L甘露糖则能够显著抑制LPS诱导的IL-1β（P=0.002 1）、IL-6(P=0.029）、IL-12(P=0.000 4）、TNF-α（P=0.000 1）和CCL2(P=0.001）蛋白分泌。另外，20 mmol/L的甘露糖单独处理能够抑制对巨噬细胞中IL-1β（P=0.045）和TNF-α（P=0.008 3）的分泌。2.4 甘露糖及甘露糖-6-磷酸的作用靶点预测

甘露糖进入细胞后大部分会在己糖激酶的作用下转变成甘露糖-6-磷酸[2]，我们通过网络药理学的方法分析了甘露糖及甘露糖-6-磷酸的潜在作用靶点。结果显示，甘露糖有101个作用靶点，甘露糖-6-磷酸有12个靶点，其中有3个是两者的共同靶点（图4）。另外，通过将化合物和炎症的20个共有靶点导入DAVID数据库进行通路富集显示，甘露糖及甘露糖-6-磷酸通过和炎症相关的20个靶点影响9条炎症信号相关通路，分别是：PI3K-Akt信号通路、HIF-1信号通路、胰岛素抵抗通路、Ras信号通路、Rap1信号通路、雌激素信号通路、孕酮介导的卵母细胞成熟通路、调节干细胞多能性的信号通路和麻疹相关通路。图4 化合物-靶点网络

【参考文献】：
期刊论文
[1]伊马替尼抑制脂多糖诱导的巨噬细胞炎症表型[J]. 王乐旬,吴惠娟,张盛昔,杨潇,郭姣.  中山大学学报(医学版). 2019(05)
[2]网络药理学——中药复方作用机制研究新视角[J]. 陈海彬,周红光,李文婷,程海波,吴勉华.  中华中医药杂志. 2019(07)



本文编号：2961213