维拉帕米的抗衰老作用及机制研究
发布时间：2021-01-07 23:46
衰老是一个由多种调节途径和转录因子共同介导的生理过程,主要体现为机体功能衰退和慢性疾病风险的增加。虽然衰老是无法避免的过程,但可以在一定程度上调控其速度。通过研发抗衰老药物来延缓衰老和延长寿命的策略一直备受关注。本课题从1386种上市药物中筛选出L型钙离子通道阻滞药物维拉帕米可延长秀丽隐杆线虫寿命,其在人胚肺成纤维细胞MRC-5上可延缓细胞衰老和提高细胞活力,并具有延长雄性果蝇寿命的趋势。维拉帕米给药处理能够显著改善线虫的健康寿命,包括爬行速度、身体扭动频率、渗透压应激抵抗能力及衰老相关的外阴完整性缺陷这些衰老相关的生理指标。进一步机制研究发现:维拉帕米作用于线虫中的L型钙离子通道的α1亚基,通过抑制钙调磷酸酶而延长线虫寿命。维拉帕米给药后LGG-1/LC3蛋白表达水平和自噬相关基因的mRNA水平的升高反映了维拉帕米可促进自噬,并且其介导的长寿需要自噬基因bec-1。另外,当线虫中的钙调磷酸酶被敲低时,维拉帕米不再进一步提高线虫的自噬水平,这提示维拉帕米的寿命延长作用是通过促进钙调磷酸酶下游的自噬过程介导的。综上所述,本文探究了维拉帕米的抗衰老作用和在线虫上的抗衰老机制,为将来维拉帕米...
【文章来源】：华东理工大学上海市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３．１线虫水平的抗衰老化合物筛选策略
第３２页?华东理工大学硕士学位论文??（Ｐｈｅｎｙｔｏｉｎｓｏｄｉｕｍ）均可显著延长线虫的寿命（Ｐ值均小于０．０００１）（图３．２ａ）。与对照??组相比，线虫在给予了?２５?ｐＭ、１００?ｐＭ、４００?浓度的维拉帕米后平均寿命分别延长??了?２５．２３％、３６．１５％、４５．１６％；线虫在给予了?２５?ｐＭ、１００?ｐＭ、４００?浓度的硝苯地平??后平均寿命分别延长了?２１．８４％、３８．９６％、２７．３０％；线虫在给予了?２５?ｎＭ、１００?ｐＭ、４００??ＨＭ浓度的苯妥英钠后平均寿命分别延长了?２４．０７％、２２．７５％、３４．０８％?（表３．１）。维拉??帕米给药后的线虫平均寿命延长的百分比更大，且具有浓度依赖性，因此我们选择了维??拉帕米作为候选抗衰老化合物。为了进一步确证维拉帕米对线虫寿命的延长作用，我们??又加大样本量重复了线虫上维拉帕米给药的寿命实验，与对照组相比，线虫在给予了?２５??ＨＭ、１００?ｐＭ、４００?ｐＭ浓度的维拉帕米后平均寿命分别延长了?１４．５７％、１９．９８％、１８．７６％??（图３．２ｂ，表３．１）。接着，在给药浓度进一步加大后，与对照组相比，线虫在给予了?４００??ｐＭ、８００?ｐＭ、１２００?ｐＭ浓度的维拉帕米后平均寿命分别延长了?２２．８２％、２４．１５％、２４．５６％??（图?３．２ｃ，表?３．１）。综上所述，２５?ｐＭ、１００?ｐＭ、４００?ｐＭ、８００?ｐＭ、１２００?ｐＭ?浓度的维??拉帕米均显著延长秀丽隐杆线虫的寿命。??（ａ）??１〇〇１????‘仰?ｃｗ??ｉＪＪ?Ｎ２／Ｐｈｅｎｙｔｏｉｎ?ｓｏｄｉｕｍ?（２５ｐＭ）??■Ｊ５?８０－?Ｌ？Ｌ－ｊ?
ｇａｎｓ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｖｅｒａｐａｍｉｌ?ａｔ?４００?ｆｊＪＶｌ，?８００?ｐＭ，?１２００?｜ｉＭ，?ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．??Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｗａｓ?ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ?ｕｓｉｎｇ?ｌｏｇ－ｒａｎｋ?（Ｍａｎｔｅｌ－Ｃｏｘ）．??３．３．２维拉帕米不影响ＯＰ５０的生长??当得出维拉帕米可显著延长线虫寿命这一结果后，我们进一步通过体外的细菌生长??实验来确定维拉帕米是否通过抑制线虫食物ＯＰ５０的生长，造成饮食限制，从而延长线??虫寿命。如图３．３ａ所示，ＯＰ５０在对照组和给药组（１００?＿、４００?ｐＭ维拉帕米）的ＮＧＭ??培养基上分别生长了?１２ｈ、２４ｈ、３６ｈ、４８ｈ、６０ｈ、７２ｈ，与对照组相比，维拉帕米两个浓??度的给药组的〇Ｐ５〇生长均无统计学上的显著差异，说明含１００?和４００?ｐＭ维拉帕米??的ＮＧＭ培养基不抑制线虫食物ＯＰ５０的生长。因此，维拉帕米在线虫上的长寿效应不??是通过抑制线虫食物的生长而实现的。??（ａ）??０８］?？?Ｃｔｒｌ??＾?■?Ｖｅｒ（１００ｐＭ）?ｚ??Ｓ?°６＇?ａ?Ｖｅｒ（４００ｐＭ）?Ｔ?Ｉ??Ｓ?，?ｉ?Ｊ??！〇．，?！??ｏ?■??０．０－１?１?，?，?，?，?，???１２?２４?３６?４８?６０?７２??Ｔｉｍｅ?（ｈ）??图３．３维拉帕米对ＯＰ５０生长无影响。（ａ）?ＯＰ５０在对照组和给药组（１００?｜ｘＭ、４００?＿维拉帕米）??的ＮＧＭ培养基上分别生长了?１２ｈ、２４ｈ、３６ｈ、４８ｈ、６０ｈ、７２ｈ的菌液ＯＤ值。Ｆ＞０．０５。使用非配对??ｔ检验进行统计学分析。??Ｆｉｇ．?３．
【参考文献】：
期刊论文
[1]Life after the birth of the mitochondrial Na+/Ca2+ exchanger,NCLX[J]. NITA Lulia I.,HERSHFINKEL Michal,SEKLER Israel. Science China（Life Sciences）. 2015(01)
本文编号：2963477
【文章来源】：华东理工大学上海市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３．１线虫水平的抗衰老化合物筛选策略
第３２页?华东理工大学硕士学位论文??（Ｐｈｅｎｙｔｏｉｎｓｏｄｉｕｍ）均可显著延长线虫的寿命（Ｐ值均小于０．０００１）（图３．２ａ）。与对照??组相比，线虫在给予了?２５?ｐＭ、１００?ｐＭ、４００?浓度的维拉帕米后平均寿命分别延长??了?２５．２３％、３６．１５％、４５．１６％；线虫在给予了?２５?ｐＭ、１００?ｐＭ、４００?浓度的硝苯地平??后平均寿命分别延长了?２１．８４％、３８．９６％、２７．３０％；线虫在给予了?２５?ｎＭ、１００?ｐＭ、４００??ＨＭ浓度的苯妥英钠后平均寿命分别延长了?２４．０７％、２２．７５％、３４．０８％?（表３．１）。维拉??帕米给药后的线虫平均寿命延长的百分比更大，且具有浓度依赖性，因此我们选择了维??拉帕米作为候选抗衰老化合物。为了进一步确证维拉帕米对线虫寿命的延长作用，我们??又加大样本量重复了线虫上维拉帕米给药的寿命实验，与对照组相比，线虫在给予了?２５??ＨＭ、１００?ｐＭ、４００?ｐＭ浓度的维拉帕米后平均寿命分别延长了?１４．５７％、１９．９８％、１８．７６％??（图３．２ｂ，表３．１）。接着，在给药浓度进一步加大后，与对照组相比，线虫在给予了?４００??ｐＭ、８００?ｐＭ、１２００?ｐＭ浓度的维拉帕米后平均寿命分别延长了?２２．８２％、２４．１５％、２４．５６％??（图?３．２ｃ，表?３．１）。综上所述，２５?ｐＭ、１００?ｐＭ、４００?ｐＭ、８００?ｐＭ、１２００?ｐＭ?浓度的维??拉帕米均显著延长秀丽隐杆线虫的寿命。??（ａ）??１〇〇１????‘仰?ｃｗ??ｉＪＪ?Ｎ２／Ｐｈｅｎｙｔｏｉｎ?ｓｏｄｉｕｍ?（２５ｐＭ）??■Ｊ５?８０－?Ｌ？Ｌ－ｊ?
ｇａｎｓ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｖｅｒａｐａｍｉｌ?ａｔ?４００?ｆｊＪＶｌ，?８００?ｐＭ，?１２００?｜ｉＭ，?ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．??Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｗａｓ?ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ?ｕｓｉｎｇ?ｌｏｇ－ｒａｎｋ?（Ｍａｎｔｅｌ－Ｃｏｘ）．??３．３．２维拉帕米不影响ＯＰ５０的生长??当得出维拉帕米可显著延长线虫寿命这一结果后，我们进一步通过体外的细菌生长??实验来确定维拉帕米是否通过抑制线虫食物ＯＰ５０的生长，造成饮食限制，从而延长线??虫寿命。如图３．３ａ所示，ＯＰ５０在对照组和给药组（１００?＿、４００?ｐＭ维拉帕米）的ＮＧＭ??培养基上分别生长了?１２ｈ、２４ｈ、３６ｈ、４８ｈ、６０ｈ、７２ｈ，与对照组相比，维拉帕米两个浓??度的给药组的〇Ｐ５〇生长均无统计学上的显著差异，说明含１００?和４００?ｐＭ维拉帕米??的ＮＧＭ培养基不抑制线虫食物ＯＰ５０的生长。因此，维拉帕米在线虫上的长寿效应不??是通过抑制线虫食物的生长而实现的。??（ａ）??０８］?？?Ｃｔｒｌ??＾?■?Ｖｅｒ（１００ｐＭ）?ｚ??Ｓ?°６＇?ａ?Ｖｅｒ（４００ｐＭ）?Ｔ?Ｉ??Ｓ?，?ｉ?Ｊ??！〇．，?！??ｏ?■??０．０－１?１?，?，?，?，?，???１２?２４?３６?４８?６０?７２??Ｔｉｍｅ?（ｈ）??图３．３维拉帕米对ＯＰ５０生长无影响。（ａ）?ＯＰ５０在对照组和给药组（１００?｜ｘＭ、４００?＿维拉帕米）??的ＮＧＭ培养基上分别生长了?１２ｈ、２４ｈ、３６ｈ、４８ｈ、６０ｈ、７２ｈ的菌液ＯＤ值。Ｆ＞０．０５。使用非配对??ｔ检验进行统计学分析。??Ｆｉｇ．?３．
【参考文献】：
期刊论文
[1]Life after the birth of the mitochondrial Na+/Ca2+ exchanger,NCLX[J]. NITA Lulia I.,HERSHFINKEL Michal,SEKLER Israel. Science China（Life Sciences）. 2015(01)
本文编号：2963477
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/yiyaoxuelunwen/2963477.html
最近更新
教材专著
