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厄贝沙坦激活PPAR-γ介导AMPK/mTOR通路诱导自噬改善LO2细胞脂肪变

发布时间:2021-01-09 14:07
  目的探讨厄贝沙坦调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)介导磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路及自噬对LO2细胞脂肪变的影响。方法采用脂混合物(LM)诱导LO2细胞建立细胞脂肪变模型,将造模后细胞分为模型组、厄贝沙坦组和厄贝沙坦联合PPAR-γ抑制剂组,另设正常组。分别干预24 h后,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)含量,并行油红O染色分析细胞内脂质沉积,通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞PPAR-γ、AMPK/m TOR信号通路相关蛋白的表达,应用激光共聚焦技术观察自噬标志蛋白LC3B的变化。结果 10μmol/L及以下浓度的厄贝沙坦对LO2细胞生长无明显毒性作用,20μmol/L厄贝沙坦对细胞毒性作用较大,表现出明显的抑制作用。与正常组比较,模型组LO2细胞内TG和TC含量升高,油红O染色显示脂质大量沉积,PPAR-γ、p-AMPK和LC3B蛋白表达水平降低,m TOR磷酸化水平升高(均P<0.05);与模型组比较,经厄贝沙坦治疗后,LO2细胞内TG和TC含... 

【文章来源】:天津医药. 2020,48(10)北大核心

【文章页数】:6 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1材料
    1.2方法
        1.2.1细胞培养
        1.2.2厄贝沙坦母液配置
        1.2.3MTT检测细胞活性
        1.2.4细胞造模、分组和药物干预
        1.2.5LO2细胞TG、TC含量的检测
        1.2.6LO2细胞油红O染色
        1.2.7蛋白免疫印迹法(Western blot)检测LO2细胞PPAR-γ及AMPK/m TOR信号通路相关蛋白的表达
        1.2.8激光共聚焦技术检测LO2细胞LC3B的表达
    1.3统计学方法
2 结果
    2.1 厄贝沙坦对LO2细胞活力的影响
    2.2 厄贝沙坦对脂混合物诱导LO2细胞TG、TC含量的影响
    2.3 厄贝沙坦对脂混合物诱导LO2细胞油红O染色的影响
    2.4 厄贝沙坦对脂混合物诱导LO2细胞PPAR-γ介导AMPK/m TOR信号通路的影响
    2.5 厄贝沙坦对脂混合物诱导LO2细胞LC3B表达的影响
3 讨论


【参考文献】:
期刊论文
[1]厄贝沙坦通过诱导自噬减轻db/db小鼠肝脏脂肪变[J]. 钟娟,青姚,吴曙粤,龚望球,龙海波.  中国病理生理杂志. 2018(03)
[2]肥胖症 非酒精性脂肪肝病的发病机制研究进展[J]. 刘瑞侠,黄有烨,胡红琳.  安徽医学. 2017(04)
[3]厄贝沙坦对2型糖尿病合并高血压患者胰岛素抵抗及胰岛β细胞功能的影响[J]. 谢洁,蒲丹岚,张莉,廖涌,胡治勇,胡昌伦.  第三军医大学学报. 2014(15)



本文编号:2966801

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