蒽酮类抗生素zunyimycin C抗MRSA活性分析
发布时间：2021-01-18 12:07
目的:对蒽酮类抗生素zunyimycin C抗MRSA活性进行分析,为解析其活性机制提供实验依据。方法:1:利用DNA重组技术,构建MRSA临床分离株来源的编码β-酮脂酰ACP合成酶II的目的基因fab F的原核表达质粒p ET32a-fab F,并转化大肠杆菌表达菌株Rosetta（DE3）,构建基因工程菌p ET32a-fab F-R;2:IPTG诱导基因工程菌p ET32a-fab F-R异源表达重组蛋白r Fab F,SDS-PAGE检测该目的蛋白是否表达,Ni-NTA亲和层析技术纯化重组蛋白r Fab F;3:利用荧光分光光度法,检测zunyimycin C与重组蛋白r Fab F相互作用后荧光淬灭情况,初步确定zunyimycin C是否通过Fab F发挥作用;4:测定zunyimycin C对MRSA临床分离株的MIC及MBC值,确定MRSA临床分离株对zunyimycin C敏感与否及耐药性;5:应用薄层色谱法检测zunyimycin C在SD大鼠体内的半衰期等药代动力学指标;6:利用MRSA感染SD大鼠模型,检测zunyimycin C对致死量MRSA感染SD大鼠的治...
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Zunyimycins系列抗生素及其结构类似物Fig.1Zunyimycinsandstructralanologues表1ZunyimycinC抗MRSA最小抑菌浓度（MIC）
图 2. zunyimycins 可能的抗 MRSA 活性分子机制Fig.2 Possible anti-MRSAactivity mechanisms of zunyimycins现代组学技术的进步为研究人员快速解析新药的作用分子机制提供了强有具[23]，尤其是在药物的抗菌分子机制解析方面的研究取得了长足的进展，是抗制研究的重要工具[24,25]。研究者可以在转录组学（Transcriptomics）水平上研作用前后细胞中基因转录的情况及转录调控变化情况，也可在蛋白Proteomics）水平上研究药物作用前后或机体的蛋白质表达差异，更可以在代（Metabolomics）水平上研究生物体（包括细胞、组织或个体）在药物作用前致机体产生的代谢产物的变化。如能将现代组学有机地结合起来，就可以及时水平、不同角度获得药物作用前后的基因表达、蛋白质合成与修饰、代谢途径变化最全面的信息，从而大大加快药物作用机制的解析。综上所述，蒽酮类抗生素 zunyimycin C 可能是通过抑制 MRSA 等革兰氏阳菌的Ⅱ型脂肪酸合成酶系统而发挥抗菌作用。本研究将通过分子生物学手段，
A 来源的 fabF 基因片段 PCR 扩增R amplification of fabF from MR2000 DNA 分子量标准；1-6 泳道：目 进行 TA 克隆，通过抗性筛选 1000 bp 处有单一条带（图 隆菌株提取质粒，质粒经 B 1000 bp 处及 3000 bp 处出现段 fabF 成功与 T 载体连接，bpM1 2 3 4 5 6 7 8 920001000750500250
【参考文献】：
期刊论文
[1]长期施用四环素残留猪粪对土壤中耐药菌及抗性基因形成的影响[J]. 张俊,杨晓洪,葛峰,王娜,焦少俊,叶波平. 环境科学. 2014(06)
硕士论文
[1]卤化聚酮类抗生素zunyimycins抑菌及抗肿瘤活性初步分析[D]. 王荫荫.遵义医学院 2017
本文编号：2984920
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Zunyimycins系列抗生素及其结构类似物Fig.1Zunyimycinsandstructralanologues表1ZunyimycinC抗MRSA最小抑菌浓度（MIC）
图 2. zunyimycins 可能的抗 MRSA 活性分子机制Fig.2 Possible anti-MRSAactivity mechanisms of zunyimycins现代组学技术的进步为研究人员快速解析新药的作用分子机制提供了强有具[23]，尤其是在药物的抗菌分子机制解析方面的研究取得了长足的进展，是抗制研究的重要工具[24,25]。研究者可以在转录组学（Transcriptomics）水平上研作用前后细胞中基因转录的情况及转录调控变化情况，也可在蛋白Proteomics）水平上研究药物作用前后或机体的蛋白质表达差异，更可以在代（Metabolomics）水平上研究生物体（包括细胞、组织或个体）在药物作用前致机体产生的代谢产物的变化。如能将现代组学有机地结合起来，就可以及时水平、不同角度获得药物作用前后的基因表达、蛋白质合成与修饰、代谢途径变化最全面的信息，从而大大加快药物作用机制的解析。综上所述，蒽酮类抗生素 zunyimycin C 可能是通过抑制 MRSA 等革兰氏阳菌的Ⅱ型脂肪酸合成酶系统而发挥抗菌作用。本研究将通过分子生物学手段，
A 来源的 fabF 基因片段 PCR 扩增R amplification of fabF from MR2000 DNA 分子量标准；1-6 泳道：目 进行 TA 克隆，通过抗性筛选 1000 bp 处有单一条带（图 隆菌株提取质粒，质粒经 B 1000 bp 处及 3000 bp 处出现段 fabF 成功与 T 载体连接，bpM1 2 3 4 5 6 7 8 920001000750500250
【参考文献】：
期刊论文
[1]长期施用四环素残留猪粪对土壤中耐药菌及抗性基因形成的影响[J]. 张俊,杨晓洪,葛峰,王娜,焦少俊,叶波平. 环境科学. 2014(06)
硕士论文
[1]卤化聚酮类抗生素zunyimycins抑菌及抗肿瘤活性初步分析[D]. 王荫荫.遵义医学院 2017
本文编号：2984920
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