PDE4抑制剂罗氟普兰对脂多糖诱导的小胶质细胞活化的抑制作用研究
发布时间：2021-01-22 03:34
目的:大脑中神经炎症的发生可以促进各种神经退行性疾病发展进程,小胶质细胞活化是神经炎症特征之一。前期研究表明磷酸二酯酶-4（phosphodiesterase-4,PDE4）抑制剂罗氟普兰（Roflupram,ROF）减轻炎症因子释放,但其机制尚未清楚,本研究旨在研究ROF对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导小胶质细胞活化的抑制作用及机制。方法:（1）使用LPS诱导BV-2细胞活化,采用ELISA试剂盒检测白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）含量,Greiss检测试剂盒检测一氧化氮（nitric oxide,NO）含量,Western blot检测诱生型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）和小胶质/巨噬细胞特异性蛋白抗Iba1抗体（ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1）表达,Iba1免疫荧光评价ROF对小胶质细胞活化的抑制作用。（2）采用Western bl...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．神经炎症过程，本图修改自文献［５］
进展中的作用是非常有意义的，??抑制小胶质细胞活化控制炎症可能有助于改善疾病进展｜１６１。因此，对小胶质细??胞的炎症因子的释放的抑制具有重要意义，针对减轻小胶质细胞活化引起的神??经炎症的Ｔ预措施可能成为治疗各神经退彳／？性疾病的策略之一。??Ｎ？ｕｒｏｎ?Ｉｎｊｕｒｙ?Ｓｉｇｎａｌｓ??〇＾＾ｅａ，ｈ／Ｄａｍａａｅ??（ＬＰＳＪＮＦ＾ＩＬ－６）?．?Ｗ?、??Ｓｏｎ????（ＩＬ－１．?ＴＮＦａ．?ＮＯ．?ＩＬ－６?）??Ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃ?Ｆａｃｔｏｒｓ??图２．小胶质细胞激活和祌经元死亡的关系，本阁修改ｈ文献｜ｌ７＇１８１??Ｆｉｇｕｒｅ?２．?Ｍｉｃｒｏｇｌｉａ?ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｎｅｕｒｏｎａｌ?ｃｅｌｌ?ｄｅａｔｈ．?Ｍｏｄｉｆｉｅｄ?ｆｒｏｍ?ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ１＇７?ＩＫ＾??憐酸：船酶４?（ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ?４，ＰＤＥ４）?＿足一种／丨？：免疫细胞中高度表达??的酶，可特异性降解细胞内源性第二信使环磷酸腺苷（ｃｙｃｌｉｃ?ａｄｅｎｏｓｉｎｅ??ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ，?ｃＡＭＰ），使细胞中ｃＡＭＰ含量降低。ＰＤＥ４包含四个亚型??（ＰＤＥ４Ａ，?ＰＤＥ４Ｂ，?ＰＤＥ４Ｃ，?ＰＤＥ４Ｄ），在炎症细胞中，ＰＤＥ４Ａ／Ｂ／Ｄ?中高??度表达｜ｉｙ｜，并ＵｌＪｉｆ．证明Ｐ［）Ｅ４Ｂ和ＰＤＥ４Ｄ调节炎症反应（图３）。一些研宄??人员认为，ＰＤＥ４Ｂ是单核细胞和嗜中性粒细胞中的主要ＰＤＥ４亚型，在引发炎??症中起主要作用［２（）１，并且ＰＤＥ４Ｂ的非选择性抑制剂通常用于千扰炎症性肺疾病??［２１１。基因敲除实验表明，敲除ＰＤＥ４Ｂ会降低ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ－ａ表达，
第一章ＰＤＥ４抑制剂ＲＯＦ对ＬＰＳ诱导的ＢＶ－２小肢质细胞活化的抑制作用研究??软件绘制统计图。??３结果??３．１?ＲＯＦ对经ＬＰＳ刺激的ＢＶ－２细胞上清中炎症因子水平的影响??在ＬＰＳ作用条件下，免疫细胞会产生炎症因子。使用ＥＬＩＳＡ试剂盒检测细??胞上清中ＴＮＦ－ａ和ＩＬ－６水平，结果如图１－１所示，与Ｃｏｎｔｒｏｌ组相比，ＬＰＳ处理??显著增加了?ＴＮＦ－ａ和ＩＬ－６水平（Ｐ＜０．０１）。相反，ＲＯＦ剂量依赖性地降低了这??些细胞因子的水平（Ｐ＜０．０１）。咯利普兰（Ｒｏｌｉｐｒａｍ）是第一代ＰＤＥ４抑制剂，??被用作阳性对照。与咯利普兰效果相似，ＲＯＦ也降低了?ＢＶ－２细胞炎症因子的水??平。上述结果表明在ＬＰＳ刺激的ＢＶ－２细胞中，ＲＯＦ可降低炎症因子的水平。??Ａ?１３００〇ｉ?孽?Ｂ??—?８０００ｎ??ｃ?一?ｔｍ??ｉ?ｎ?＾?ｉ?■?ｘ??３?８〇〇°－?Ｔ?６０００－?＾??ｒ－１－！?Ｃｕｏ?＊＊?＊＊??ｌ?ｇ＊＊＊＊?念一??ｚ?１１?—?一甲?４０００?丄?；Ｍ?！??卜?＾１，１１，１１，１１，１１，１?士?ｉ＾ｌ?ＩＩ?１１，１１．１１１??ＬＰＳ?■?＋?＋＋＋＋?ＬＰＳ?－?＋?＋＋＋?＋??ＲＯＦ?５?１０?２０?－?ＲＯＦ?－?５?１０?２０?－??ｒｏｌｉｐｒａｍ?＋?ｒｏｌｉｐｒａｍ?＋??图１－１?ＲＯＦ对经ＬＰＳ刺激的ＢＶ－２细胞上清中炎症因子水平的影响。用不同浓度的Ｒ〇Ｆ（５，??１０，?２０?ｎＭ）或２０?ｐＭ咯利普兰预处理细胞１?ｈ，然后再用ＬＰＳ?（１昭仰！；１）处理另外８?ｈ。??使用ＥＬＩＳＡ试剂盒检测细胞上清
本文编号：2992470
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．神经炎症过程，本图修改自文献［５］
进展中的作用是非常有意义的，??抑制小胶质细胞活化控制炎症可能有助于改善疾病进展｜１６１。因此，对小胶质细??胞的炎症因子的释放的抑制具有重要意义，针对减轻小胶质细胞活化引起的神??经炎症的Ｔ预措施可能成为治疗各神经退彳／？性疾病的策略之一。??Ｎ？ｕｒｏｎ?Ｉｎｊｕｒｙ?Ｓｉｇｎａｌｓ??〇＾＾ｅａ，ｈ／Ｄａｍａａｅ??（ＬＰＳＪＮＦ＾ＩＬ－６）?．?Ｗ?、??Ｓｏｎ????（ＩＬ－１．?ＴＮＦａ．?ＮＯ．?ＩＬ－６?）??Ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃ?Ｆａｃｔｏｒｓ??图２．小胶质细胞激活和祌经元死亡的关系，本阁修改ｈ文献｜ｌ７＇１８１??Ｆｉｇｕｒｅ?２．?Ｍｉｃｒｏｇｌｉａ?ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｎｅｕｒｏｎａｌ?ｃｅｌｌ?ｄｅａｔｈ．?Ｍｏｄｉｆｉｅｄ?ｆｒｏｍ?ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ１＇７?ＩＫ＾??憐酸：船酶４?（ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ?４，ＰＤＥ４）?＿足一种／丨？：免疫细胞中高度表达??的酶，可特异性降解细胞内源性第二信使环磷酸腺苷（ｃｙｃｌｉｃ?ａｄｅｎｏｓｉｎｅ??ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ，?ｃＡＭＰ），使细胞中ｃＡＭＰ含量降低。ＰＤＥ４包含四个亚型??（ＰＤＥ４Ａ，?ＰＤＥ４Ｂ，?ＰＤＥ４Ｃ，?ＰＤＥ４Ｄ），在炎症细胞中，ＰＤＥ４Ａ／Ｂ／Ｄ?中高??度表达｜ｉｙ｜，并ＵｌＪｉｆ．证明Ｐ［）Ｅ４Ｂ和ＰＤＥ４Ｄ调节炎症反应（图３）。一些研宄??人员认为，ＰＤＥ４Ｂ是单核细胞和嗜中性粒细胞中的主要ＰＤＥ４亚型，在引发炎??症中起主要作用［２（）１，并且ＰＤＥ４Ｂ的非选择性抑制剂通常用于千扰炎症性肺疾病??［２１１。基因敲除实验表明，敲除ＰＤＥ４Ｂ会降低ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ－ａ表达，
第一章ＰＤＥ４抑制剂ＲＯＦ对ＬＰＳ诱导的ＢＶ－２小肢质细胞活化的抑制作用研究??软件绘制统计图。??３结果??３．１?ＲＯＦ对经ＬＰＳ刺激的ＢＶ－２细胞上清中炎症因子水平的影响??在ＬＰＳ作用条件下，免疫细胞会产生炎症因子。使用ＥＬＩＳＡ试剂盒检测细??胞上清中ＴＮＦ－ａ和ＩＬ－６水平，结果如图１－１所示，与Ｃｏｎｔｒｏｌ组相比，ＬＰＳ处理??显著增加了?ＴＮＦ－ａ和ＩＬ－６水平（Ｐ＜０．０１）。相反，ＲＯＦ剂量依赖性地降低了这??些细胞因子的水平（Ｐ＜０．０１）。咯利普兰（Ｒｏｌｉｐｒａｍ）是第一代ＰＤＥ４抑制剂，??被用作阳性对照。与咯利普兰效果相似，ＲＯＦ也降低了?ＢＶ－２细胞炎症因子的水??平。上述结果表明在ＬＰＳ刺激的ＢＶ－２细胞中，ＲＯＦ可降低炎症因子的水平。??Ａ?１３００〇ｉ?孽?Ｂ??—?８０００ｎ??ｃ?一?ｔｍ??ｉ?ｎ?＾?ｉ?■?ｘ??３?８〇〇°－?Ｔ?６０００－?＾??ｒ－１－！?Ｃｕｏ?＊＊?＊＊??ｌ?ｇ＊＊＊＊?念一??ｚ?１１?—?一甲?４０００?丄?；Ｍ?！??卜?＾１，１１，１１，１１，１１，１?士?ｉ＾ｌ?ＩＩ?１１，１１．１１１??ＬＰＳ?■?＋?＋＋＋＋?ＬＰＳ?－?＋?＋＋＋?＋??ＲＯＦ?５?１０?２０?－?ＲＯＦ?－?５?１０?２０?－??ｒｏｌｉｐｒａｍ?＋?ｒｏｌｉｐｒａｍ?＋??图１－１?ＲＯＦ对经ＬＰＳ刺激的ＢＶ－２细胞上清中炎症因子水平的影响。用不同浓度的Ｒ〇Ｆ（５，??１０，?２０?ｎＭ）或２０?ｐＭ咯利普兰预处理细胞１?ｈ，然后再用ＬＰＳ?（１昭仰！；１）处理另外８?ｈ。??使用ＥＬＩＳＡ试剂盒检测细胞上清
本文编号：2992470
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/yiyaoxuelunwen/2992470.html
最近更新
教材专著
