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普乐安片DNA条形码分子鉴定研究

发布时间:2021-01-23 03:20
  建立基于DNA条形码技术的普乐安片处方成分鉴定方法。共收集8个厂家的16份普乐安片样品,分别采用植物和动物基因组DNA提取试剂盒提取样品DNA,所获DNA的ITS2序列扩增成功率均为100%,细胞色素C氧化酶亚基I (COI)序列扩增成功率分别为43.75%和56.25%。对于ITS2序列, 12份样品可获得高质量测序峰图,鉴定结果为油菜Brassica campestris, 4份样品存在较严重套峰,经克隆测序鉴定为油菜和黑芥B. nigra。对于COI序列通用引物获得的9份PCR产物,其中2份样品可直接进行PCR产物测序,鉴定结果为蚜虫类, 7份样品经克隆测序获得82条序列,其中5份样品可检测到意大利蜜蜂Apis mellifera, 7份样品均可检测到病原菌或病虫害。为解决COI通用引物因外源污染导致的蜜蜂源检测失败问题,新设计2对蜜蜂属Apis的COI引物,扩增效率均为43.75%,7份PCR产物直接测序的鉴定结果均为意大利蜜蜂A. mellifera。9份未检测到蜜蜂源的普乐安片来自同一厂家生产的3个不同批次,且每个批次含3份样品,推测原料花粉非蜜蜂采集所得。本研究基于ITS... 

【文章来源】:药学学报. 2020,55(06)北大核心

【文章页数】:7 页

【文章目录】:
材料与方法
结果
    1 普乐安片DNA提取、PCR扩增成功率与测序结果
    2 普乐安片植物源成分的基原物种鉴定
    3 基于COI序列通用引物的普乐安片蜜蜂源成分鉴定
    4 基于COI序列的蜂属特异性引物对普乐安片中蜜蜂源成分鉴定
讨论


【参考文献】:
期刊论文
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[3]基于ITS2序列的中药材苍术种苗DNA条形码鉴定[J]. 刘金欣,李耿,陈彩霞,魏妙洁,王燕,赵春颖,石林春.  中国实验方剂学杂志. 2018(02)
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[5]普乐安片HPLC指纹图谱研究[J]. 程巧鸳,张文婷,陈碧莲,郑成,郑瑜倩.  中成药. 2016(01)
[6]市售鹿茸粉药材的DNA条形码鉴定[J]. 贾静,石林春,徐志超,辛天怡,宋经元,陈士林.  药学学报. 2015(10)
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[8]中药材DNA条形码分子鉴定指导原则[J]. 陈士林,姚辉,韩建萍,辛天怡,庞晓慧,石林春,罗焜,宋经元,侯典云,石上梅,钱忠直.  中国中药杂志. 2013(02)
[9]羌活药材ITS/ITS2条形码鉴定及其稳定性与准确性研究[J]. 辛天怡,姚辉,罗焜,向丽,马晓冲,韩建萍,林余霖,宋经元,陈士林.  药学学报. 2012(08)
[10]油菜花粉研究进展[J]. 冯慧,焦士蓉,唐远谋,唐鹏程,刘佳.  食品工业. 2011(09)



本文编号:2994447

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