高尔基磷蛋白3对5-氟尿嘧啶化疗耐药的人结肠癌细胞影响研究

发布时间：2021-01-24 04:37

　　目的探讨人结肠癌细胞中高尔基磷蛋白3（GOLPH3）基因高表达与结肠癌细胞对5-氟尿嘧啶（5-FU）的耐药的相关性。方法 HT29细胞分为5组:对照组（HT29）,转染组（siRNA-GOLPH3）,实验组1(30μmol·L^-15-FU),实验组2(siRNA-GOLPH3+30μmol·L^-15-FU),实验组3(30μmol·L^-15-FU+50μmol·L^-1PD98059)。人结肠癌细胞转染siRNA-GOLPH3,以逆转录聚合酶链反应方法检测GOLPH3基因的沉默效果,以噻唑蓝、流式细胞术检测各组细胞增殖和凋亡,以Western blot法检测GOLPH3,P糖蛋白（P-gp）,ERK1/2和p ERK1/2蛋白的表达。结果对照组和转染组的GOLPH3 mRNA的蛋白相对表达量分别为1.00±0.08和0.15±0.02,差异有统计学意义（P<0.05）,表明GOLPH3基因沉默效果好。实验组1、实验组2和对照组的增殖能力分别为0.80±0.10,0.24±0.09和1.05±0.... 

【文章来源】：中国临床药理学杂志. 2020,36(03)北大核心

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
        细胞
        试剂
    2 实验方法
        2.1 细胞培养与分组
        2.2 以逆转录聚合酶链反应 （RT-PCR） 检测结肠癌细胞株HT29转染前后GOLPH3 mRNA的表达[4]
        2.3 以噻唑蓝 （MTT） 法检测各组细胞增殖[5]
        2.4 以流式细胞法检测各组细胞凋亡率[5]
        2.5 以Western Blot检测各组细胞株GOLPH3、p-gp、ERK1/2和p ERK1/2蛋白质的表达[6]
    3 统计学处理
结果
    1 HT29结肠癌细胞转染效果检测
        1.1 HT29结肠癌细胞转染后GOLPH3表达量检测
        1.2转染组HT29细胞增殖能力检测
    2 GOLPH3基因参与HT29细胞对5-FU化疗耐药的研究
        2.1 5-FU处理下干扰GOLPH3基因对HT29细胞增殖的影响
        2.2 5-FU处理下干扰GOLPH3基因对HT29细胞凋亡的影响
    3 各组蛋白表达结果
讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]人结肠癌细胞中高尔基磷蛋白3表达与Wnt信号通路的关系[J]. 陈志雄,洪钟时,邱成志,余外市,王春晓,郭延塔.  中国普通外科杂志. 2016(10)
[2]淫羊藿素对大鼠软骨细胞作用的实验研究[J]. 何李乐,王万春.  中南大学学报(医学版). 2015(05)
[3]IGFBP-2及IGFBP-6在结直肠癌中的表达及意义[J]. 薛晶,赵杨,张建伟,焦艳,申兴斌.  医学与哲学（B）. 2014(12)
[4]Recent studies of 5-fluorouracil resistance in pancreatic cancer[J]. Wei-Bin Wang,Yu Yang,Yu-Pei Zhao,Tai-Ping Zhang,Quan Liao,Hong Shu.  World Journal of Gastroenterology. 2014(42)
[5]高尔基磷酸化蛋白3在结直肠癌组织中的表达及其与血管生成的关系[J]. 王春晓,邱成志,余外市,吴友谊,黄种心.  中华实验外科杂志. 2013 (08)



本文编号：2996587