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抑制线粒体丙酮酸载体通过激活AMPK-ACC通路改善棕榈酸诱导的HepG2细胞脂肪变性

发布时间:2021-02-15 18:17
  目的探究抑制线粒体丙酮酸载体(mitochondrial pyruvate carrier,MPC)是否通过激活腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)-乙酰辅酶A羧化酶(acetyl CoA carboxylase,ACC)通路,改善棕榈酸(palmitic acid,PA)所致HepG2细胞脂肪变性情况。方法利用PA处理HepG2细胞作为高脂负荷模型组,实验分为正常对照组、模型组和MPC抑制组。油红O染色分析细胞的油脂蓄积情况。RT-PCR检测AMPK、ACC、CPT1A、SREBP1 mRNA表达水平。全自动蛋白分析仪检测AMPK、p-AMPK、ACC、p-ACC、SREBP1蛋白表达水平。结果 PA可以诱导HepG2细胞胞质内聚集大量环状脂滴,降低p-AMPK、p-ACC蛋白表达水平,提高SREBP1基因以及蛋白表达水平。MPC抑制剂UK5099可以减少PA所致HepG2细胞胞质内脂滴数量,提高p-AMPK、p-ACC蛋白表达水平,降低SREBP1基因以及蛋白表达水平。结论体外抑制MPC可以明显改善PA所致HepG2细胞脂肪变性。... 

【文章来源】:中国药理学通报. 2020,36(12)北大核心

【文章页数】:5 页

【文章目录】:
1 材料
    1.1 细胞来源
    1.2 试剂
    1.3 仪器
2 方法
    2.1 细胞培养和主要试剂配制
    2.2 CCK8测定细胞活力
    2.3 细胞的分组
    2.4 Real-time PCR检测目的基因的表达
    2.5 全自动蛋白质定量检测仪定量检测相关蛋白表达
    2.6 油红O染色观察脂质堆积
    2.7 统计学分析
3 结果
    3.1 不同浓度PA、MPC抑制剂UK5099对HepG2细胞活力的影响
    3.2 抑制MPC可以改善PA所致HepG2细胞脂质堆积的情况
    3.3 体外抑制MPC通过激活AMPK-ACC通路改善脂质堆积情况
4 讨论


【参考文献】:
期刊论文
[1]小檗碱通过抑制脂肪酸摄取降低小鼠原代肝细胞脂质沉积[J]. 俞牧雨,米日阿依·阿里木江,刘威,殷峻.  中国药理学通报. 2018(03)



本文编号:3035321

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