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脑利钠肽结构与生物学活性的体外研究

发布时间:2021-03-02 11:15
  脑利钠肽(Brain natriuretic peptide,BNP)是由心肌细胞分泌包含32个氨基酸残基的多肽,具有促进排钠、排尿、舒张血管,可对抗肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的缩血管作用。重组人脑利钠肽(Recombinant human Brain Natriuretic Peptide,rhBNP)是人脑利钠肽基因体外表达的产物,是治疗心衰的临床用药。论文分为两个部分。第一部分,根据血液中存在的二肽基肽酶DPP-Ⅳ可能对BNP发挥特异性切割作用,从而降低血液BNP浓度(活性),体外表达、纯化出纯度大于98%的rhBNP,建立了体外DPP-Ⅳ酶切rhBNP方法,DPP-Ⅳ最佳酶切条件:DPP-Ⅳ与rhBNP终浓度比1:500、酶切时间4 h、酶切缓冲体系20 mmol/l Tris-HCl pH7.8。建立了基于HPLC鉴定DPP-Ⅳ酶切产物的方法并纯化获得纯度大于95%的3-32BNP。采用稳转BNP受体细胞系,结合特异性ELISA方法,比较了酶切前后rhBNP生物学活性,3次实验结果经统计学t检验算出P(rhBNP、酶切rhBNP)=0.0716>0.05,... 

【文章来源】:河北科技大学河北省

【文章页数】:81 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

脑利钠肽结构与生物学活性的体外研究


脑利钠肽肽链分子结构

作用机制


的启动子位于 5’端上游区域,虽然心房中 BNP更大,所以心型 BNP 大部分源自心室。心房中,而新生儿不然,因此心室和心房中脑利钠肽的的受体胞膜跨膜受体特异性结合,发挥细胞信号传导A、NPR-B 和 NPR-C 三种二聚体跨膜蛋白。其合部位,胞内部位有鸟苷酸环化酶催化结构域、异性结合,胞外信号跨膜传导,使胞内鸟苷酸为 cGMP,cGMP 发挥第二信使作用,cGMP 使磷酸二酯酶(PDEs)激活,产生多种信号通路的作这个域的受损或缺失都会促使受体失去活性,结合。NPR-C 受体与 NPR-A 和 NPR-B 不同,其的清除回收工作[15],见图 1-2[16]。

响应曲线,工作原理,芯片,表面折射率


共振角跟芯片表面折射率成反比,芯片表面折射率跟芯片结合的分,通过实时测定芯片表面折光率 n 的变化形成响应曲线,经过数据线数据拟合后就能得到样品浓度、亲和力(平衡结合/解离常数)、动力率)常数和特异性等数据。通过检测器就能实时分析芯片表面固定的分子的相互作用全过程,原理如下图 1-3[48]:

【参考文献】:
期刊论文
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[9]重组蛋白表达系统的研究进展[J]. 范翠英,冯利兴,樊金玲,果德安,刘璇.  生物技术. 2012(02)
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本文编号:3059168

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