天然产物来源丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶抑制剂的筛选

发布时间：2021-03-09 03:27

　　丙型肝炎病毒（Hepatitis c virus,HCV）感染可导致肝纤维化,肝硬化,肝癌甚至死亡,严重危害了人类健康。NS3/4A蛋白酶是研发抗HCV药物的重要靶点,本研究利用实验室已构建好的NS3/4A蛋白酶抑制剂筛选模型从真菌SIPIFW-F4581和云南美登木中筛选活性化合物,并进行结构鉴定和定量的NS3/4A蛋白酶抑制活性评价。首先对真菌SIPIFW-F4581的发酵培养基进行了筛选,考察了Y-1培养基、Y-2培养基、Y-3培养基、Y-4培养基、Y-5培养基和Y-6培养基,结果显示Y-1培养基和Y-6培养基发酵真菌SIPIFW-F4581时,其代谢产物具有较高NS3/4A蛋白酶抑制活性。接着,本研究利用Y-1培养和Y-6培养基进行SIPIFW-F4581的大规模发酵,并对其产生的代谢产物进行以活性为导向的分离纯化。最终获得两个活性化合物:J-1和J-2,其中J-1为新化合物,命名为（E）-2,4-二羟基-6-丙烯基苯甲醛,IC50是17.9 m M;J-2结构鉴定为（2S,3R）-2,3,4-三甲基-5,7-二羟基-2,3-苯并二氢呋喃,IC50是312.0μM,本研究为首次... 

【文章来源】：中国医药工业研究总院上海市

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
英文缩写说明
第1章 绪论
    1.1 丙型肝炎病毒与抗丙型肝炎病毒药物
        1.1.1 丙型肝炎病毒的结构与复制
        1.1.2 抗HCV药物
    1.2 HCV NS3/4A蛋白酶及其抑制剂的开发
        1.2.1 HCV NS3/4A蛋白酶的结构与功能
        1.2.2 HCV NS3/4A蛋白酶抑制剂
    1.3 立题依据
    1.4 实验技术路线
第2章 SIPIFW-F4581中NS3/4A蛋白酶抑制剂的筛选
    2.1 试剂与仪器
        2.1.1 实验仪器
        2.1.2 实验材料与溶剂
        2.1.3 培养基
    2.2 实验方法
        2.2.1 SIPIFW-F4581发酵培养基的筛选
        2.2.2 SIPIFW-F4581中活性代谢产物分离
        2.2.3 活性化合物的结构鉴定
    2.3 实验结果
        2.3.1 SIPIFW-F4581发酵培养基的筛选
        2.3.2 SIPIFW-F4581中NS3/4A蛋白酶抑制剂的筛选
    2.4 本章小结和讨论
第3章 美登木中NS3/4A蛋白酶抑制剂的筛选
    3.1 试剂与仪器
        3.1.1 实验仪器
        3.1.2 实验材料与溶剂
    3.2 实验方法
        3.2.1 提取
        3.2.2 美登木正丁醇萃取组分中活性代谢产物分离
    3.3 实验结果
        3.3.1 活性化合物Z-1 的分离纯化和结构鉴定
        3.3.2 活性化合物Z-2 的分离纯化和结构鉴定
        3.3.3 活性化合物Z-3 的分离纯化和结构鉴定
        3.3.4 活性化合物Z-4 的分离纯化和结构鉴定
    3.4 本章小结和讨论
第4章 化合物的生物活性评价
    4.1 试剂与仪器
    4.2 实验方法
        4.2.1 待测样品的配制
        4.2.2 样品NS3/4A蛋白酶抑制率的测定
    4.3 实验结果
    4.4 本章小结和讨论
全文总结
参考文献
对进一步研究工作的设想和建议
攻读学位期间发表的学术论文、专利申请
致谢
附录



本文编号：3072166